相对定量还是绝对定量分不清楚,跪求问题,重赏!!!
跪求请问这段话描述的到底是相对定量pcr还是绝对定量pcr,在网上查了很多资料说相对的不需要标曲,想像他一样获得细胞中mRNA的含量完全不知道什么意思,不做这个相关的,只想要这一小部分数据,跪求回答,快毕业了好头疼。
“通过测定 control RNA(在 Revert Aid First Strand c DNA合成试剂盒的人GAPDH m RNA)的标准曲线,将Ct 值转化成绝对GAPDH 拷贝数。
标准曲线通过配制不同浓度的control RNA通过同样条件的逆转录和 q PCR定量得到。每个浓度均重复测定三次。通过计数的细胞个数,得到细胞内平均的
GAPDH的拷贝数。细胞内的mRNA ACTB 和 TK1 参照 GAPDH 表达量,通过 2–ΔΔCt方法计算得到”
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绝对啊,都绝对拷贝数了
表达出来是绝对定量的意思。写的不好,没有写清楚,绝对定量一些关键的东西没有明确给出。
相对定量因为没有做标准曲线,细胞内基因的表达量mRNA ACTB 和 TK1 只能相互比较。在相对定量中,要么以ACTB的表达量为标准(一般默认为1),TK1相对于ACTB的表达量为多少,要么以TK1的表达量为标准,ACTB的表达量为多少。
绝对定量因为有标准曲线,mRNA ACTB 和 TK1 都可以通过比较标准曲线计算出表达量。即以标准曲线的表达量为标准,mRNA ACTB 和 TK1 的表达量为多少,