HPLC突然出现巨大的杂峰
在测氨基酸的时候,同一个样品,同样梯度洗脱,之前不会出现47min的峰的,突然就出现了,之后跑的所有样品都有这个峰,跑超纯水也会出现。是什么原因呢?求求各位大佬指点一下,液相小白好多都不太懂
我使用的流动相是A(盐)和B(乙腈:水=4:1),最后45min到55min是切换流动相,从0:100到100:0。色谱柱是4.6*150mm的反相C18柱。
想请问一下是什么原因呢?

之前的图.jpg

47min出现巨大的峰.jpg
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京公网安备 11010802022153号
是55min设置为100:0
,
不影响你的结果就别管了
可能是柱子脏了,梯度中设置冲洗程序,试一下
应该是有杂质引起的,得排除下是哪里出现的,换下b再试试
这个峰可能是前面一针或几针的残留。判断依据是这个峰较胖,比前后的小峰都胖,此外这个峰后还有很多小峰,说明很大概率很多杂质没有洗脱出来。此外,等度洗脱,强度不够。
是不是色谱柱有吸附啊,换色谱柱试试呢