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醉在花荫里

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC突然出现巨大的杂峰 已有7人参与

在测氨基酸的时候,同一个样品,同样梯度洗脱,之前不会出现47min的峰的,突然就出现了,之后跑的所有样品都有这个峰,跑超纯水也会出现。是什么原因呢?求求各位大佬指点一下,液相小白好多都不太懂
我使用的流动相是A(盐)和B(乙腈:水=4:1),最后45min到55min是切换流动相,从0:100到100:0。色谱柱是4.6*150mm的反相C18柱。
想请问一下是什么原因呢?

HPLC突然出现巨大的杂峰
之前的图.jpg


HPLC突然出现巨大的杂峰-1
47min出现巨大的峰.jpg
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王小跳

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

衍生方法吧,换下流动相A,看看还会不会出现,你色谱柱上有保护柱吧,如果换了流动相A,把保护柱拆下来,直接上柱子,或者换个保护柱上,看看还出不出现
2楼2021-01-28 14:44:18
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

根据我的经验,这个东西跟滤膜的关系很大,换滤膜试试,特别时过滤流动相的滤膜
3楼2021-01-28 16:13:42
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diy患者

铁虫 (正式写手)

这种杂峰在切换成100%甲醇时非常常见,既然超纯水也有,那就不是某种物质。不用处理吧。

难以解释的是以前为何没有。
6楼2021-02-03 07:54:29
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单手ji鞋带

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

45-55min的切换是梯度过程还是突发过程,或者这么问:你是在45.01min设置为100:0还是55min设置为100:0的
7楼2021-02-21 15:29:11
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mao0321

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

上个鬼峰补集柱,大概率能消除或减轻
8楼2021-02-22 16:57:35
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luokereng

铁杆木虫 (职业作家)

10楼2021-03-26 22:47:51
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醉在花荫里

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 王小跳 at 2021-01-28 14:44:18
衍生方法吧,换下流动相A,看看还会不会出现,你色谱柱上有保护柱吧,如果换了流动相A,把保护柱拆下来,直接上柱子,或者换个保护柱上,看看还出不出现

没有保护柱,衍生的话,跟之前做的完全一样

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4楼2021-02-01 21:16:52
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醉在花荫里

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by t892893235 at 2021-01-28 16:13:42
根据我的经验,这个东西跟滤膜的关系很大,换滤膜试试,特别时过滤流动相的滤膜

滤膜也是同样的0.22有机的滤膜,都是一个盒子的,可能样品我过的膜不太一样?我没太注意这个

发自小木虫IOS客户端
5楼2021-02-01 21:17:46
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醉在花荫里

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 单手ji鞋带 at 2021-02-21 15:29:11
45-55min的切换是梯度过程还是突发过程,或者这么问:你是在45.01min设置为100:0还是55min设置为100:0的

是55min设置为100:0
9楼2021-02-27 13:37:59
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