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急！！两种质粒共转BL21问题，请高手支招！

作者 更深的蓝888: 来源: 小木虫 550 11 举报帖子

各位请问两种质粒共同转化表达菌株BL21（DE3）为什么诱导不出带来呢？复制子不一样，抗性不一样，菌液pcr都有带，用的PH8.0 Tris HCl 裂解菌体，BL21 condon 稀有密码子对照菌株同样结果，一个蛋白诱导出来了，想要的目的蛋白没有诱导出来，实在想不通，目前正在将两种蛋白互换标签（PS：小木虫为什么不能发picture）返回小木虫查看更多

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精华评论

汪和烤羊排

请问你的问题解决了吗？我现在遇到了同样的问题，方便的话能不能私信一下我，我们互加一下微信讨论一下？谢谢！
天下苍凉

我也想问一下，我在BL21DE3中共转了pET28a和pET22b，我两个蛋白都表达了。但是，我老师说这是不可以的。因为复制子一样的情况下，质粒不能共存。可是，我在培养基中添加了两种抗生素，难道不应该可以共存吗？
pennchem

引用回帖:
10楼: Originally posted by 天下苍凉 at 2022-01-30 09:52:59
我也想问一下，我在BL21DE3中共转了pET28a和pET22b，我两个蛋白都表达了。但是，我老师说这是不可以的。因为复制子一样的情况下，质粒不能共存。可是，我在培养基中添加了两种抗生素，难道不应该可以共存吗？

之前有理论说，如果复制子一样的两个质粒在同一宿主菌内会不兼容。

但是后面也有人发文章，说同样的pET质粒，不同抗性也可以表达出蛋白（因为抗性筛选压力吧）
，
bbrine

我想请教一下，共同转化后涂板长菌也是16h吗，因为我试过共转化很多次，但在涂板后都没长菌