应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 急！！两种质粒共转BL21问题，请高手支招！
121/1返回列表
查看: 2281  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

更深的蓝888

银虫 (小有名气)

[交流] 急！！两种质粒共转BL21问题，请高手支招！

各位请问两种质粒共同转化表达菌株BL21（DE3）为什么诱导不出带来呢？复制子不一样，抗性不一样，菌液pcr都有带，用的PH8.0 Tris HCl 裂解菌体，BL21 condon 稀有密码子对照菌株同样结果，一个蛋白诱导出来了，想要的目的蛋白没有诱导出来，实在想不通，目前正在将两种蛋白互换标签（PS：小木虫为什么不能发picture）
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2020-12-08 22:46:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 天下苍凉 at 2022-01-30 09:52:59
我也想问一下，我在BL21DE3中共转了pET28a和pET22b，我两个蛋白都表达了。但是，我老师说这是不可以的。因为复制子一样的情况下，质粒不能共存。可是，我在培养基中添加了两种抗生素，难道不应该可以共存吗？

之前有理论说，如果复制子一样的两个质粒在同一宿主菌内会不兼容。

但是后面也有人发文章，说同样的pET质粒，不同抗性也可以表达出蛋白（因为抗性筛选压力吧）
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2022-01-30 10:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crashandburn

银虫 (正式写手)
★
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
单独做都可以吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2020-12-15 07:23:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

季末季末

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
共表达是需要抗性不一样么？不一样的话凃板的时候用哪个抗性呀

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2020-12-23 09:40:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

更深的蓝888

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 季末季末 at 2020-12-23 09:40:28
共表达是需要抗性不一样么？不一样的话凃板的时候用哪个抗性呀

在两个载体的抗性筛选就可以
赞一下 回复此楼
8楼2020-12-25 20:43:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

汪和烤羊排

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你的问题解决了吗？我现在遇到了同样的问题，方便的话能不能私信一下我，我们互加一下微信讨论一下？谢谢！
赞一下 回复此楼
9楼2021-04-07 20:08:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天下苍凉

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也想问一下，我在BL21DE3中共转了pET28a和pET22b，我两个蛋白都表达了。但是，我老师说这是不可以的。因为复制子一样的情况下，质粒不能共存。可是，我在培养基中添加了两种抗生素，难道不应该可以共存吗？
赞一下 回复此楼
10楼2022-01-30 09:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbrine

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我想请教一下，共同转化后涂板长菌也是16h吗，因为我试过共转化很多次，但在涂板后都没长菌
赞一下 回复此楼
12楼2022-02-14 15:19:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
苏州华博2楼
2020-12-14 13:47   回复  
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
1
miaojiabing3楼
2020-12-14 16:30   回复  
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
1
psylhh4楼
2020-12-14 23:08   回复  
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
1
闲得腾云去5楼
2020-12-15 04:03   回复  
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
8
相关版块跳转 我要订阅楼主 更深的蓝888 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭