应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 急！！两种质粒共转BL21问题，请高手支招！
汕头大学海洋科学接受调剂
121/1返回列表
查看: 2136  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

更深的蓝888

银虫 (小有名气)

[交流] 急！！两种质粒共转BL21问题，请高手支招！

各位请问两种质粒共同转化表达菌株BL21（DE3）为什么诱导不出带来呢？复制子不一样，抗性不一样，菌液pcr都有带，用的PH8.0 Tris HCl 裂解菌体，BL21 condon 稀有密码子对照菌株同样结果，一个蛋白诱导出来了，想要的目的蛋白没有诱导出来，实在想不通，目前正在将两种蛋白互换标签（PS：小木虫为什么不能发picture）
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2020-12-08 22:46:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 天下苍凉 at 2022-01-30 09:52:59
我也想问一下，我在BL21DE3中共转了pET28a和pET22b，我两个蛋白都表达了。但是，我老师说这是不可以的。因为复制子一样的情况下，质粒不能共存。可是，我在培养基中添加了两种抗生素，难道不应该可以共存吗？

之前有理论说，如果复制子一样的两个质粒在同一宿主菌内会不兼容。

但是后面也有人发文章，说同样的pET质粒，不同抗性也可以表达出蛋白（因为抗性筛选压力吧）
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2022-01-30 10:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crashandburn

银虫 (正式写手)
★
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
单独做都可以吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2020-12-15 07:23:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

季末季末

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
共表达是需要抗性不一样么？不一样的话凃板的时候用哪个抗性呀

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2020-12-23 09:40:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

更深的蓝888

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 季末季末 at 2020-12-23 09:40:28
共表达是需要抗性不一样么？不一样的话凃板的时候用哪个抗性呀

在两个载体的抗性筛选就可以
赞一下 回复此楼
8楼2020-12-25 20:43:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

汪和烤羊排

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你的问题解决了吗？我现在遇到了同样的问题，方便的话能不能私信一下我，我们互加一下微信讨论一下？谢谢！
赞一下 回复此楼
9楼2021-04-07 20:08:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天下苍凉

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也想问一下，我在BL21DE3中共转了pET28a和pET22b，我两个蛋白都表达了。但是，我老师说这是不可以的。因为复制子一样的情况下，质粒不能共存。可是，我在培养基中添加了两种抗生素，难道不应该可以共存吗？
赞一下 回复此楼
10楼2022-01-30 09:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbrine

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我想请教一下，共同转化后涂板长菌也是16h吗，因为我试过共转化很多次，但在涂板后都没长菌
赞一下 回复此楼
12楼2022-02-14 15:19:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
苏州华博2楼
2020-12-14 13:47   回复  
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
1
miaojiabing3楼
2020-12-14 16:30   回复  
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
1
psylhh4楼
2020-12-14 23:08   回复  
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
1
闲得腾云去5楼
2020-12-15 04:03   回复  
更深的蓝888(金币+1): 谢谢参与
8
相关版块跳转 我要订阅楼主 更深的蓝888 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂求收留 +33 果然有我 2026-04-10 34/1700 2026-04-15 00:37 by zzzggc
[考研] 290调剂生物0860 +35 哇哈哈，。 2026-04-11 41/2050 2026-04-14 23:47 by Xurambo2014
[考研] 211本科材料化工求调剂 +19 YHLAH 2026-04-11 23/1150 2026-04-14 22:25 by fenglj492
[考研] 327求调剂 +23 Xxjc1107. 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 18:48 by 逍遥三郎
[考研] 279求调剂 +12 张番茄不炒蛋 2026-04-11 12/600 2026-04-14 15:38 by zs92450
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +4 双一流本科机械 2026-04-08 4/200 2026-04-14 07:32 by Abskk
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[基金申请] 2026 WR青拔 +3 冬日阳光CAS 2026-04-09 6/300 2026-04-13 18:40 by liuchb715
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 296求调剂 +14 汪！？！ 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 本人女孩 +7 吼吼， 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 296求调剂 +6 汪！？！ 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +6 白云123456789 2026-04-09 8/400 2026-04-10 21:13 by zhouxiaoyu
[考研] 计算机类求调剂，22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 一志愿京区985，085401，与本科专业一致，电子信息工程， +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 332，085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭