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更深的蓝888

银虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
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在线: 36.7小时
虫号: 3296634

[交流] 急！！两种质粒共转BL21问题，请高手支招！

各位请问两种质粒共同转化表达菌株BL21（DE3）为什么诱导不出带来呢？复制子不一样，抗性不一样，菌液pcr都有带，用的PH8.0 Tris HCl 裂解菌体，BL21 condon 稀有密码子对照菌株同样结果，一个蛋白诱导出来了，想要的目的蛋白没有诱导出来，实在想不通，目前正在将两种蛋白互换标签（PS：小木虫为什么不能发picture）

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1楼 2020-12-08 22:46:34

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pennchem

专家顾问 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

10楼: Originally posted by 天下苍凉 at 2022-01-30 09:52:59
我也想问一下，我在BL21DE3中共转了pET28a和pET22b，我两个蛋白都表达了。但是，我老师说这是不可以的。因为复制子一样的情况下，质粒不能共存。可是，我在培养基中添加了两种抗生素，难道不应该可以共存吗？

之前有理论说，如果复制子一样的两个质粒在同一宿主菌内会不兼容。

但是后面也有人发文章，说同样的pET质粒，不同抗性也可以表达出蛋白（因为抗性筛选压力吧）

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