各位老师们。我最近几个月WB条带一直跑的很难看，见下图。每个泳道的条带都是哑铃状，两端信号很浓呈黑点，中间信号特别淡。我的目的条带70，其他分子量的蛋白（10~100）我跑下来也是这样，只不过没有这么明显（蛋白信号强的条带就好很多不太看得出来）。问了老板和师兄师姐。还是没有找到原因。
    我每次转膜液、电泳液都是新配的，我们用millipore的PVDF膜。试了8%、10%、12%的胶都是这样
    最开始我想是不是我蛋白和loading没有混好，然后煮的时候特别注意混匀了，还是这样。
    然后考虑是不是胶现用现配的原因，所以我最近一次是配了之后过夜再跑的，还是这样。
    有师兄说是胶没配好，可我不知道哪里没配好。。。我感觉这个坎过不去了
    论坛里的各位老师们同道们，能帮我找下原因吗？拜托拜托了


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