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LAMP实验阴性也有扩增

作者 大头er_崽
来源: 小木虫 450 9 举报帖子
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遇到的问题简直令我头秃,上周本来测试的一个引物好好的,只有加了模板的阳性才能扩增,阴性完美对照。

但是这周开始,这个引物也不行啦,阴性也开始出现扩增了,加了UDG也不能很好的解决。

我用的是钙黄绿素和HNB来显色的,所以没有开过盖子,大半个月显色问题终于解决,但是阴性开始扩增了,我要哭了,太难了,这个实验的污染也太重了,想请教各位大神,大佬,大好人们,大家有什么防污染的建议可以给到我吗?不胜感激啊,感激涕零啊!!!

还有就是这个2019-nCOV假病毒的N基因大家有好用的引物吗?我在网站上设计的五对引物的特异性都不是很好,还请各位大神,大佬,大好人帮帮我吧!!!谢谢啦!!!
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  • 精华评论
  • Creek0501

    过段时间再做,消除污染的影响。试试GLAPD进行引物设计

  • 大头er_崽

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by Creek0501 at 2020-08-26 09:51:23
    过段时间再做,消除污染的影响。试试GLAPD进行引物设计

    谢谢朋友,GLAPD是可以进行LAMP引物设计的吗?我用的是那个PrimerExplore设计的,然后那个LOOP引物是自己设计的。

  • Creek0501

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 大头er_崽 at 2020-08-26 10:02:12
    谢谢朋友,GLAPD是可以进行LAMP引物设计的吗?我用的是那个PrimerExplore设计的,然后那个LOOP引物是自己设计的。...

    对,专门设计特异且通用的LAMP引物

  • 大头er_崽

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by Creek0501 at 2020-08-26 10:03:42
    对,专门设计特异且通用的LAMP引物...

    我搜不到这个可以设计引物的哎,是个软件吗还是啥呀?多谢多谢

  • Creek0501

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by 大头er_崽 at 2020-08-26 10:24:28
    我搜不到这个可以设计引物的哎,是个软件吗还是啥呀?多谢多谢...

    https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31921040/

  • 大头er_崽

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by Creek0501 at 2020-08-26 10:28:51
    https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31921040/...

    感谢感谢,不胜感激

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