基因敲除可能脱靶了,求助
请问哪位同仁做过基因敲除的?我做了几次都没有成功。很奇怪,菌株是获得了筛选标记-抗生素的抗性,但是通过PCR验证,PCR产物大小与出发菌株吻合。筛选了几十菌落,都是这样。有没有同仁给点意见和建议的。多了好久了。@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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请问哪位同仁做过基因敲除的?我做了几次都没有成功。很奇怪,菌株是获得了筛选标记-抗生素的抗性,但是通过PCR验证,PCR产物大小与出发菌株吻合。筛选了几十菌落,都是这样。有没有同仁给点意见和建议的。多了好久了。@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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补充,两侧的同源臂都是400-500bp。
我用Crisper cas9做KO,可以拿到阳性克隆
楼主你最后怎么解决的啊
我也是能在抗性板上长,但是pcr验证不对
送出去做,投降了
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