支原体污染显微镜下看不出来，可以测一下

hek 293细胞贴壁型（半贴壁），生长较快，常用于病毒包装使用

你的提问，可以做以下考虑：

1.  细胞代次较高，培养状态不佳

2.  细胞老化：对数生长期活力旺盛细胞较少，死细胞碎片黏附

3.  支原体污染：PCR，设计支原体引物，两轮PCR检测即可（设计阳性对照组、阴性对照组、目的组、空白组，四个组），

楼主的情况，解决方案是：1，重新购买株系，因为你这个明显使用双抗是解决不了的；2，非要处理的话，得需要清除细菌或支原体的试剂。我不是商家，有一款试剂很好用，我之前就遇到了你说的情况。迪，医，明，自己去搜索吧

可以到ATCC官网上查一下细胞正常形态，和自己的对比一下看看是不是正常。