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【悬赏金币】回答本帖问题，作者tjuwyn将赠送您 5 个金币

tjuwyn

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1140610
注册: 2010-11-07
专业: 生化分析及生物传感

[求助] HEK293细胞形态已有2人参与

各位前辈，初尝细胞培养，养的是HEK293T细胞，复苏时细胞分散的挺好，贴壁也挺好的，但是两天后观察细胞表面有很多黑点，成簇生长的细胞看不清形态，很脏的样子，详见图片，请问是支原体污染了吗？

657977335188420935.jpg

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1楼 2020-07-10 09:53:47

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shgnsw

木虫 (著名写手)

应助: 4 (幼儿园)
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在线: 339.1小时
虫号: 6992512
注册: 2017-07-26
专业: 细胞、亚细胞结构与功能

支原体污染显微镜下看不出来，可以测一下

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2楼2020-07-10 10:13:59

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博士苑

新虫 (初入文坛)

应助: 9 (幼儿园)
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虫号: 21931297
注册: 2020-04-20
专业: 细胞生物学研究中的新方法

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

hek 293细胞贴壁型（半贴壁），生长较快，常用于病毒包装使用

你的提问，可以做以下考虑：

1.  细胞代次较高，培养状态不佳

2.  细胞老化：对数生长期活力旺盛细胞较少，死细胞碎片黏附

3.  支原体污染：PCR，设计支原体引物，两轮PCR检测即可（设计阳性对照组、阴性对照组、目的组、空白组，四个组）

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3楼2020-07-10 11:07:34

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