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tjuwyn

新虫 (小有名气)

[求助] HEK293细胞形态 已有2人参与

各位前辈,初尝细胞培养,养的是HEK293T细胞,复苏时细胞分散的挺好,贴壁也挺好的,但是两天后观察细胞表面有很多黑点,成簇生长的细胞看不清形态,很脏的样子,详见图片,请问是支原体污染了吗?

HEK293细胞形态
657977335188420935.jpg
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博士苑

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
hek 293细胞贴壁型(半贴壁),生长较快,常用于病毒包装使用

你的提问,可以做以下考虑:

1.  细胞代次较高,培养状态不佳

2.  细胞老化:对数生长期活力旺盛细胞较少,死细胞碎片黏附

3.  支原体污染:PCR,设计支原体引物,两轮PCR检测即可(设计阳性对照组、阴性对照组、目的组、空白组,四个组)
3楼2020-07-10 11:07:34
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shgnsw

木虫 (著名写手)

支原体污染显微镜下看不出来,可以测一下
2楼2020-07-10 10:13:59
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wit0329

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主的情况,解决方案是:1,重新购买株系,因为你这个明显使用双抗是解决不了的;2,非要处理的话,得需要清除细菌或支原体的试剂。我不是商家,有一款试剂很好用,我之前就遇到了你说的情况。迪,医,明,自己去搜索吧
4楼2020-07-12 19:39:47
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huanlele

新虫 (小有名气)

可以到ATCC官网上查一下细胞正常形态,和自己的对比一下看看是不是正常。

发自小木虫IOS客户端
5楼2020-07-13 07:58:37
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