小木虫

当前位置：首页 > 微米纳米 >金纳米棒修饰DNA

金纳米棒修饰DNA

作者 油条vs豆浆: 来源: 小木虫 550 11 举报帖子

大家好，我最近尝试往金纳米棒上修饰巯基化DNA，利用的是低pH高盐法修饰，从紫外上能看到260有明显的DNA吸收峰，合成之后的产物也非常稳定，多次离心都能很好地收集到产物（应该不存在DNA脱落等因素）；
但是在尝试结合互补链DNA的时候却一直都不能够成功（验证方式：1. 紫外看产物260吸收峰无明显变化；2.投入与修饰探针等量的互补链DNA，在结合后未发现上清中DNA含量变少），想请教下大家这是哪方面出问题了？
尝试过的影响因素：1、DNA在金纳米棒上的修饰比例；2、反应的温度、pH等返回小木虫查看更多

今日热帖

精华评论

supernatural

存在位阻，DNA不容易互补配对
你可以尝试先让DNA互补配对，再把双链DNA连接到金表面
o看i

好
o看i

我
油条vs豆浆

引用回帖:
2楼: Originally posted by supernatural at 2020-06-12 17:24:03
存在位阻，DNA不容易互补配对
你可以尝试先让DNA互补配对，再把双链DNA连接到金表面

谢谢建议，你的这种方法我也尝试过，但似乎DNA双链在低pH高盐环境下容易解链，没能成功把互补链留住；我后续再尝试下直接修饰吧，就是时间相对长一点。
另外，想和你探讨一下关于这个DNA链的空间位阻影响，这种位阻是不是主要是DNA链离金表面太近，如果我把spacer序列长度加大一点，是不是会一定程度消除这种影响？其实我原来已经加了5个A了，我现在计划再加一点，因为我的实验这个互补链上还需要继续加互补链，做杂交链反应形成个长链聚合物，所以还是优先想考虑解决这个位阻问题
，
supernatural

引用回帖:
5楼: Originally posted by 油条vs豆浆 at 2020-06-17 10:27:06
谢谢建议，你的这种方法我也尝试过，但似乎DNA双链在低pH高盐环境下容易解链，没能成功把互补链留住；我后续再尝试下直接修饰吧，就是时间相对长一点。
另外，想和你探讨一下关于这个DNA链的空间位阻影响，这种位 ...

位阻主要是静电排斥和空间位阻，如果你后期还要加互补链，我觉得还是先杂交再偶联好些，只要设计的互补碱基超过10个，我感觉杂交后的双链没有那么容易解链。关于加spacer，已经加了spacer了，再加spacer感觉影响应该不是很大。
油条vs豆浆

引用回帖:
6楼: Originally posted by supernatural at 2020-06-17 11:18:49
位阻主要是静电排斥和空间位阻，如果你后期还要加互补链，我觉得还是先杂交再偶联好些，只要设计的互补碱基超过10个，我感觉杂交后的双链没有那么容易解链。关于加spacer，已经加了spacer了，再加spacer感觉影响应 ...

好的，谢谢
慧儿~

可以留个联系方式吗我最近也遇到了这样的问题