求助。最近在构建原核表达质粒上出问题,想请问各位大神
求助。最近在构建原核表达质粒上出问题,想请问各位大神
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我最近在弄这个,将目的片段连接到PET-21d上(酶切位点是Ncol和BamHI)。但是做了几次了,16℃连接过夜后进行转化(DH5α)图板,可平板上(AMP抗性)空空如也,啥也没有。
而且质粒的提取和双酶切都没啥问题。
想试试有没有同学做过这方面的实验,可以分享一下心得吗?
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求助。最近在构建原核表达质粒上出问题,想请问各位大神
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我最近在弄这个,将目的片段连接到PET-21d上(酶切位点是Ncol和BamHI)。但是做了几次了,16℃连接过夜后进行转化(DH5α)图板,可平板上(AMP抗性)空空如也,啥也没有。
而且质粒的提取和双酶切都没啥问题。
想试试有没有同学做过这方面的实验,可以分享一下心得吗?
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你好,我最近在做pet-30a的ncoⅠ和bamhⅠ双酶切链接,还没有成功。能问下你双酶切以后的质粒纯化浓度多少吗
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