应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » [优秀文章推荐]中大构建了一种高效的Cas9驱动的基因转录激活方法
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
41/1返回列表
查看: 3970  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

晋鹏

版主 (知名作家)

[交流] [优秀文章推荐]中大构建了一种高效的Cas9驱动的基因转录激活方法 已有3人参与

[优秀文章推荐]中大构建了一种高效的Cas9驱动的基因转录激活方法


        CRISPR SAM（synergistic activation mediator）采用切割活性缺失的dCas9蛋白融合VP64转录激活蛋白，加上能与RNA结合蛋白MS2的sgRNA2.0，特异性识别并结合目标基因的启动子。MS2蛋白上连接p65和HSF1转录激活蛋白。通过多种转录激活蛋白的协同作用，能更好的模拟细胞内转录激活（图1，CRISPR/Cas9 SAM原理）。研究表明，单一位点SAM的转录激活效果远高于多个位点dCas9-VP64的转录激活效果。

[优秀文章推荐]中大构建了一种高效的Cas9驱动的基因转录激活方法-1


        与传统转基因相比，CRISPRa系统是通过激活细胞内源基因表达来提高目标基因的表达量，它不需要转入外源DNA，降低了由于转基因造成的基因组不可逆转突变的风险。另外，结合gRNA文库，可同时激活多个基因的转录与表达。此前Gain-Of-Function筛选主要是通过cDNA文库实现，但由于部分cDNA克隆难度较大致使cDNA文库覆盖率不完全；同时cDNA文库并不能涵盖每个基因的所有转录本；基因的表达也会受到细胞内部元件的调控。利用dCas9-VP64-gRNA系统进行的高通量筛选可在同一个启动子上设计多个gRNA来提高基因的转录活性，基因转录本也会更为全面。已有研究表明，利用CRISPR/Cas9系统选择性的上调基因表达，可以用来诱导干细胞的分化或重编程、刺激组织再生、补偿遗传缺陷、激活已经失活的抑癌基因、进行基因功能筛选以及合成基因回路。

[优秀文章推荐]中大构建了一种高效的Cas9驱动的基因转录激活方法-2


        例如：当转录激活子VP64与dCas9融合后，能够促进靶向基因的表达。但后续实验证实，若直接将dCas9与VP64融合，只能较小程度地提高转录水平。人们试着将VP64与dCas9的氨基端和羧基端融合或将dCas9与10拷贝数的VP64融合，均能提高CRISPR-dCas9对基因表达的促进作用。

[优秀文章推荐]中大构建了一种高效的Cas9驱动的基因转录激活方法-3


        转录激活子VP64与dCas9融合可以促进靶向基因的表达，但只能较小程度地提高转录水平。目前报道的三种基于dCas9技术的转录激活系统（VPR, SAM和SunTag）在动物细胞中得到很好的应用，但在植物中还没有一种有效的转录激活系统，该研究团队报道了一种植物中的高效的转录激活系统 dCas9–TV，与 dCas9–VP64相比， dCas9–TV在单基因或者多基因的激活方面都表现的比较强的激活效率，另外研究表明，该系统同样适用动物细胞。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

农林进展

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

晴川123

» 猜你喜欢
及时行乐，人生不留遗憾！
1楼 2017-11-22 21:28:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
厉害

发自小木虫Android客户端
回复此楼
2楼2017-11-22 21:40:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴川123
送红花一朵


发自小木虫Android客户端
3楼2017-12-02 02:33:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明清远

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
研究扎实，思路清晰
赞一下 回复此楼
4楼2020-03-13 10:58:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 晋鹏 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化工求调剂！ +17 RichLi_ 2026-04-06 17/850 2026-04-06 22:26 by qlm5820
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +6 王王白石 2026-04-06 7/350 2026-04-06 21:46 by dongzh2009
[考研] 求助071001调剂！！！ +4 黄守松 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:55 by 1028907439
[考研] 332求调剂 +17 小小孟... 2026-04-05 18/900 2026-04-06 09:51 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿西安交大材料学硕（英一数二）347，求调剂到高分子/材料相关专业 +8 zju51 2026-03-31 10/500 2026-04-06 09:03 by 醉翁wl
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +13 努力奋斗112 2026-04-04 13/650 2026-04-06 07:13 by jj987
[考研] 282求调剂 +7 aaa车辆 2026-04-02 11/550 2026-04-05 17:24 by yulian1987
[考研] 材料化工306分找合适调剂 +14 沧海轻舟e 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:53 by 朱云虎202
[考研] 353求调剂 +10 MayUxw1 2026-04-03 10/500 2026-04-05 09:23 by 无际的草原
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +19 Doleres 2026-03-31 20/1000 2026-04-04 16:44 by 啊俊！
[考研] 265求调剂 +17 林深温澜 2026-04-01 20/1000 2026-04-04 01:09 by userper
[考研] 283分材料与化工求调剂 +29 罗KAKA 2026-04-02 29/1450 2026-04-03 23:56 by userper
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 考研求调剂 +3 木心想继续深造 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:56 by 啵啵啵0119
[考研] 材料考研调剂 +10 Gs大王 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:47 by 遗忘消失的灆
[考研] 一志愿陕西师范大学生物学317分 +5 1563日。 2026-04-02 5/250 2026-04-03 06:58 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿9初试366 本双非求调剂 +4 运气来得若有似� 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:56 by guanxin1001
[考研] 311求调剂 +10 李芷新1 2026-03-31 10/500 2026-04-01 14:38 by chenqifeng666
[考研] 调剂申请 +8 张张张张zy 2026-03-31 9/450 2026-04-01 08:29 by zjbkx
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭