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烟草基因组提取呈现胶冻状难溶物

作者 Abrahamyang
来源: 小木虫 450 9 举报帖子
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根据经典CTAB法提取烟草叶片基因组DNA,加入异丙醇后出现白色絮状沉淀,用70%乙醇洗涤后吹干,用水或者TE溶解,均难以溶解,呈现胶冻状物质,也无法再次用裂解液溶解,该怎么解决?寻求帮助 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • hanzegang

    引用回帖:
    8楼: Originally posted by Abrahamyang at 2017-01-11 19:30:23
    提取的基因组DNA不但用水或者TE无法溶解,就是放到裂解液里想要重新抽提,都溶解不了,这顽固分子究竟是什么?...

    按道理来说,烟草的DNA很好提取,你的问题我也没有遇到过。说几点,自己认为可能的原因吧。
    1) 尽量取幼嫩的烟草叶片,不要太多,1至2g就足够了;
    2)磨样的时候尽量快,而且要磨彻底,用液氮磨样或者直接在EP管里磨样都可以;
    3) 吸取上清的时候,要轻柔。氯仿异戊醇可以抽提两次;
    4)异丙醇沉淀后,酒精洗上两次,吹干溶解。
    另外,你仔细看看自己配的提取液啊什么的,不要有问题,PH值调对。
    我能想到的,只有这么多了

  • Abrahamyang

    引用回帖:
    9楼: Originally posted by hanzegang at 2017-01-11 19:43:31
    按道理来说,烟草的DNA很好提取,你的问题我也没有遇到过。说几点,自己认为可能的原因吧。
    1) 尽量取幼嫩的烟草叶片,不要太多,1至2g就足够了;
    2)磨样的时候尽量快,而且要磨彻底,用液氮磨样或者直接在EP管 ...

    谢谢你的分析,我会仔细分析我的错误在哪里的!

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