需要做一段120-150bp的双链DNA,没有模板可以用 公司说最多只能合成60nt的单链,怎么设计PCR反应把这个双链扩出来呢?引物用多少没关系,步骤不要太多 返回小木虫查看更多
这个直接全基因合成就行啊,我们可以的
三条60bp的单链,1和3是正链,2是反链,注意需要overlap,1和2退火,再1+2和3退火,可以得到类似双链的模板产物,用此产物作模板,注意不要做胶收回。 再用一对引物,PCR,应该是可以达到目的的。
嗯,楼上的方法很好啊,可以试试
这个直接全基因合成就行啊,我们可以的
我老板是铁公鸡啊~~~伊肯定不会让我去找公司做合成的
最简单的方法当然是随便找个双链的片段,然后一点点接引物往外延长出去~
最后再把延长出来的片段单独扩出来,只是觉得太麻烦了
大片段连接也做过,只是这片段实在是不大不�
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三条60bp的单链,1和3是正链,2是反链,注意需要overlap,1和2退火,再1+2和3退火,可以得到类似双链的模板产物,用此产物作模板,注意不要做胶收回。
再用一对引物,PCR,应该是可以达到目的的。
嗯,楼上的方法很好啊,可以试试