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454 测序中，如何保证每个微磁珠只连接一个DNA分子?

作者 冰封_911: 来源: 小木虫 250 5 举报帖子

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RT：454 测序中，如何保证每个微磁珠只连接一个DNA分子?
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精华评论

gaoyang636

通过控制模板DNA浓度，所以精确的定量至关重要。
但是即便浓度控制得很好，仍然会有很少一部分磁珠上连接N个不同DNA分子，或者没有连接任何DNA分子的，这两种情况都会造成该磁珠的测序失败，影响通量。
冰封_911

能不能说得详细点呢？
gaoyang636

引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰封_911 at 2013-05-31 08:38:43
能不能说得详细点呢？

给你个tips：点下方的“回复此楼”按钮，这样原帖主人才能看到你留言了。

我是刚看到有奖励通知，才知道你留言了。

我想知道你问这个问题的用意在哪里？是单纯想了解原理，还是打算亲手建一个库，并且ePCR？
冰封_911

引用回帖:
4楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-06-03 09:46:18
给你个tips：点下方的“回复此楼”按钮，这样原帖主人才能看到你留言了。

我是刚看到有奖励通知，才知道你留言了。

我想知道你问这个问题的用意在哪里？是单纯想了解原理，还是打算亲手建一个库，并且ePCR？...

建库，还有ePCR。能给我点比较详细的东西吗，这个我真不懂得哦
kinsic

建议你去看这个论文参考一下

里面提到

采用磁珠和胶固定方法制备分子克隆的方法
BEAMing超支滚环扩增克隆法

《DNA甲基化检测方法的研究及其在胃癌基因甲基化研究中的应用》

作者：房汝敬
学科专业：  生物医学工程
学位授予单位：  东南大学
导师姓名：陆祖宏
学位年度：2009
分类号：R735.2
关键词：
DNA甲基化知识脉络基因芯片知识脉络胃癌知识脉络固相滚环扩增知识脉络微乳液扩增知识脉络
在线出版日期： 2009年9月28日，