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冰封_911

银虫 (小有名气)

[求助] 454 测序中,如何保证每个微磁珠 只连接一个DNA分子?

RT:454 测序中,如何保证每个微磁珠 只连接一个DNA分子?
求大神解惑!!!
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记住,没有什么可以让你一蹶不振,也没有什么可以让你得意忘形。
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
冰封_911(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\\\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-30 10:09:42
冰封_911: 金币+29, 有帮助, 没人回答,给你算了。 2013-06-03 09:43:28
通过控制模板DNA浓度,所以精确的定量至关重要。
但是即便浓度控制得很好,仍然会有很少一部分磁珠上连接N个不同DNA分子,或者没有连接任何DNA分子的,这两种情况都会造成该磁珠的测序失败,影响通量。
2楼2013-05-27 18:27:59
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冰封_911

银虫 (小有名气)

能不能说得详细点呢?
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3楼2013-05-31 08:38:43
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰封_911 at 2013-05-31 08:38:43
能不能说得详细点呢?

给你个tips:点下方的“回复此楼”按钮,这样原帖主人才能看到你留言了。

我是刚看到有奖励通知,才知道你留言了。

我想知道你问这个问题的用意在哪里? 是单纯想了解原理,还是打算亲手建一个库,并且ePCR?
4楼2013-06-03 09:46:18
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冰封_911

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-06-03 09:46:18
给你个tips:点下方的“回复此楼”按钮,这样原帖主人才能看到你留言了。

我是刚看到有奖励通知,才知道你留言了。

我想知道你问这个问题的用意在哪里? 是单纯想了解原理,还是打算亲手建一个库,并且ePCR?...

建库,还有ePCR。能给我点比较详细的东西吗,这个我真不懂得哦
记住,没有什么可以让你一蹶不振,也没有什么可以让你得意忘形。
5楼2013-06-04 16:01:05
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kinsic

铁虫 (初入文坛)

建议你去看这个论文参考一下

里面提到

采用磁珠和胶固定方法制备分子克隆的方法
BEAMing超支滚环扩增克隆法

《DNA甲基化检测方法的研究及其在胃癌基因甲基化研究中的应用》

作者: 房汝敬  
学科专业:  生物医学工程  
学位授予单位:  东南大学  
导师姓名: 陆祖宏  
学位年度:2009  
分类号:R735.2  
关键词:
DNA甲基化知识脉络    基因芯片知识脉络    胃癌知识脉络    固相滚环扩增知识脉络    微乳液扩增知识脉络  
在线出版日期: 2009年9月28日
6楼2013-09-12 13:12:52
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