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冰封_911

银虫 (小有名气)

[求助] 454 测序中，如何保证每个微磁珠 只连接一个DNA分子?

RT：454 测序中，如何保证每个微磁珠 只连接一个DNA分子?
求大神解惑！！！
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1楼 2013-05-27 17:00:51
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kinsic

铁虫 (初入文坛)
建议你去看这个论文参考一下

里面提到

采用磁珠和胶固定方法制备分子克隆的方法
BEAMing超支滚环扩增克隆法

《DNA甲基化检测方法的研究及其在胃癌基因甲基化研究中的应用》

作者： 房汝敬  
学科专业：  生物医学工程  
学位授予单位：  东南大学  
导师姓名： 陆祖宏  
学位年度：2009  
分类号：R735.2  
关键词：
DNA甲基化知识脉络    基因芯片知识脉络    胃癌知识脉络    固相滚环扩增知识脉络    微乳液扩增知识脉络  
在线出版日期： 2009年9月28日
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6楼2013-09-12 13:12:52
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
冰封_911(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\\\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-30 10:09:42
冰封_911: 金币+29, ★有帮助, 没人回答，给你算了。 2013-06-03 09:43:28
通过控制模板DNA浓度，所以精确的定量至关重要。
但是即便浓度控制得很好，仍然会有很少一部分磁珠上连接N个不同DNA分子，或者没有连接任何DNA分子的，这两种情况都会造成该磁珠的测序失败，影响通量。
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2楼2013-05-27 18:27:59
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冰封_911

银虫 (小有名气)
能不能说得详细点呢？
赞一下 回复此楼
记住，没有什么可以让你一蹶不振，也没有什么可以让你得意忘形。
3楼2013-05-31 08:38:43
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰封_911 at 2013-05-31 08:38:43
能不能说得详细点呢？

给你个tips：点下方的“回复此楼”按钮，这样原帖主人才能看到你留言了。

我是刚看到有奖励通知，才知道你留言了。

我想知道你问这个问题的用意在哪里？ 是单纯想了解原理，还是打算亲手建一个库，并且ePCR？
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-03 09:46:18
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