1.首先说明你的这个方法中 咖啡因标准溶液的配置有问题，应该用水溶解caffeine，这样进样时就不会出现峰拖尾了或峰形不好了。
2.你这个测试线性的方法设计有问题。你用一个浓度溶液分别进10ul、20ul、50ul、100ul。你这考察的是进样器的进样体积的线性。实际在我们的仪器验证中更看重的是响应的线性。也就是说你应该配置一系列不同浓度的caffeine的水溶液。如：0.5ug/ml、1.0ug/ml、50ug/ml、250ug/ml、500ug/ml，然后进同样体积（如10ul或20ul）的溶液。出图后，做响应与浓度的线性，这是我们通常说的线性。

对不起，我写错了。这五个溶液的浓度是：0.5ug/ml、1.0ug/ml、5.0ug/ml、25ug/ml、50ug/ml。

尝试用流动相稀释样品试试。另外线性需要配制不同浓度溶液，最好不要通过进样量变化来做线性

做法2楼讲的很清楚，色谱现象可以理解为：体积超载

体积梯度的比例不塌理想，尝试其他的配比。