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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助：用咖啡因标准溶液在高效液相中做线性
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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baiyuefei

版主 (文学泰斗)

风雪

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[求助] 求助：用咖啡因标准溶液在高效液相中做线性

如题 ，配制10微克每毫升的咖啡因标准溶液，进样体积10,20,50，100微升，20出现拖尾峰，50出现不规则驼峰，100就飞了。请教高手解决办法！
用色谱级甲醇稀释咖啡因
流动相：甲醇：水：65:35
柱子都是新的
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1楼 2013-03-28 22:42:07
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
baiyuefei: 金币+80, 有效应助！ 2013-03-29 13:47:50
baiyuefei: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-03-29 18:48:14
1.首先说明你的这个方法中 咖啡因标准溶液的配置有问题，应该用水溶解caffeine，这样进样时就不会出现峰拖尾了或峰形不好了。
2.你这个测试线性的方法设计有问题。你用一个浓度溶液分别进10ul、20ul、50ul、100ul。你这考察的是进样器的进样体积的线性。实际在我们的仪器验证中更看重的是响应的线性。也就是说你应该配置一系列不同浓度的caffeine的水溶液。如：0.5ug/ml、1.0ug/ml、50ug/ml、250ug/ml、500ug/ml，然后进同样体积（如10ul或20ul）的溶液。出图后，做响应与浓度的线性，这是我们通常说的线性。
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有因有果
2楼2013-03-28 23:25:01
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师

【答案】应助回帖

对不起，我写错了。这五个溶液的浓度是：0.5ug/ml、1.0ug/ml、5.0ug/ml、25ug/ml、50ug/ml。
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有因有果
3楼2013-03-29 00:27:27
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
baiyuefei: 金币+5, ★有帮助 2013-03-29 18:48:03
尝试用流动相稀释样品试试。另外线性需要配制不同浓度溶液，最好不要通过进样量变化来做线性
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
4楼2013-03-29 08:13:32
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baiyuefei

版主 (文学泰斗)

风雪

优秀版主优秀版主优秀版主文献杰出贡献优秀版主优秀版主优秀版主文献杰出贡献优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主文献杰出贡献优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuting_li at 2013-03-28 23:25:01
1.首先说明你的这个方法中 咖啡因标准溶液的配置有问题，应该用水溶解caffeine，这样进样时就不会出现峰拖尾了或峰形不好了。
2.你这个测试线性的方法设计有问题。你用一个浓度溶液分别进10ul、20ul、50ul、100ul。 ...

谢谢，请教高手：
可咖啡因微溶于水，不溶解怎么作为标准溶液？
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5楼2013-03-29 13:47:34
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
baiyuefei: 金币+5, ★有帮助 2013-03-29 18:47:50
做法2楼讲的很清楚，色谱现象可以理解为：体积超载
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6楼2013-03-29 15:13:51
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师
引用回帖:
5楼: Originally posted by baiyuefei at 2013-03-29 13:47:34
谢谢，请教高手：
可咖啡因微溶于水，不溶解怎么作为标准溶液？...

我给用户做仪器认证时使用的都是这样的caffeine水溶液（0.5、1.0、5.0、25.0、50.0）ug/ml；还有100ug/ml，200ug/ml的caffeine溶液，所以我想这个浓度50ug/ml以下的溶液是比较溶液制备的。
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有因有果
7楼2013-03-29 22:47:55
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jsh0610

铁杆木虫 (正式写手)
体积梯度的比例不塌理想，尝试其他的配比。
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jjii
8楼2013-03-30 08:58:16
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