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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助：用咖啡因标准溶液在高效液相中做线性
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baiyuefei

版主 (文学泰斗)

风雪

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[求助] 求助：用咖啡因标准溶液在高效液相中做线性

如题 ，配制10微克每毫升的咖啡因标准溶液，进样体积10,20,50，100微升，20出现拖尾峰，50出现不规则驼峰，100就飞了。请教高手解决办法！
用色谱级甲醇稀释咖啡因
流动相：甲醇：水：65:35
柱子都是新的
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1楼 2013-03-28 22:42:07
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
baiyuefei: 金币+5, ★有帮助 2013-03-29 18:47:50
做法2楼讲的很清楚，色谱现象可以理解为：体积超载
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6楼2013-03-29 15:13:51
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
baiyuefei: 金币+80, 有效应助！ 2013-03-29 13:47:50
baiyuefei: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-03-29 18:48:14
1.首先说明你的这个方法中 咖啡因标准溶液的配置有问题，应该用水溶解caffeine，这样进样时就不会出现峰拖尾了或峰形不好了。
2.你这个测试线性的方法设计有问题。你用一个浓度溶液分别进10ul、20ul、50ul、100ul。你这考察的是进样器的进样体积的线性。实际在我们的仪器验证中更看重的是响应的线性。也就是说你应该配置一系列不同浓度的caffeine的水溶液。如：0.5ug/ml、1.0ug/ml、50ug/ml、250ug/ml、500ug/ml，然后进同样体积（如10ul或20ul）的溶液。出图后，做响应与浓度的线性，这是我们通常说的线性。
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有因有果
2楼2013-03-28 23:25:01
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师

【答案】应助回帖

对不起，我写错了。这五个溶液的浓度是：0.5ug/ml、1.0ug/ml、5.0ug/ml、25ug/ml、50ug/ml。
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有因有果
3楼2013-03-29 00:27:27
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
baiyuefei: 金币+5, ★有帮助 2013-03-29 18:48:03
尝试用流动相稀释样品试试。另外线性需要配制不同浓度溶液，最好不要通过进样量变化来做线性
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
4楼2013-03-29 08:13:32
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