在提DNA的时候不小心把放异丙醇的瓶子里加入了氯仿异戊醇,加入这样的异丙醇会有什么影响?加完后还是分了两层,能不能离心继续取上清再加异丙醇? 返回小木虫查看更多
不行的 ,加入异丙醇会使DNA沉淀,离心后DNA和氯仿异戊醇一起沉到底部,这样取上清就没有意义了,还是重提吧
不一定吧,异丙醇应该是溶解在有机层,不一定是DNA沉淀。LZ可以尝试一下
生物学试验特别是操作核酸基因蛋白质的试验,犯这种常识性的错误实在是不应该的........
异丙醇沉淀应该是在氯仿异戊醇后面一步,你 现在是将氯仿异戊醇当做异丙醇加进去了,相当于把抽提步骤多做了一,应该可以补救的,就是继续离心取上清,然后再加异丙醇沉淀,就是抽提得到的体积少了。做实验犯错是难免的,常识性的错误也会犯,但是要学会分析问题及时补救。我们都是在不断犯错中成长的。祝你好运,
这事有点乱,一堆互溶的东西跑一起去了,就说不清楚了啊
应该不会有啥影响,氯仿异戊醇是用来除去蛋白的,异丙醇是用来沉淀DNA的,混着加的话一部分异丙醇会溶到氯仿异戊醇相中,可能会让蛋白和核酸沉到一起,也可能因为异丙醇量减少会使沉淀的效果差些,上清重加异丙醇试一试吧。个人观点啊 [ Last edited by 进步一点点 on 2013-3-27 at 02:08 ]
不行的 ,加入异丙醇会使DNA沉淀,离心后DNA和氯仿异戊醇一起沉到底部,这样取上清就没有意义了,还是重提吧
不一定吧,异丙醇应该是溶解在有机层,不一定是DNA沉淀。LZ可以尝试一下
生物学试验特别是操作核酸基因蛋白质的试验,犯这种常识性的错误实在是不应该的........
异丙醇沉淀应该是在氯仿异戊醇后面一步,你 现在是将氯仿异戊醇当做异丙醇加进去了,相当于把抽提步骤多做了一,应该可以补救的,就是继续离心取上清,然后再加异丙醇沉淀,就是抽提得到的体积少了。做实验犯错是难免的,常识性的错误也会犯,但是要学会分析问题及时补救。我们都是在不断犯错中成长的。祝你好运,
这事有点乱,一堆互溶的东西跑一起去了,就说不清楚了啊
应该不会有啥影响,氯仿异戊醇是用来除去蛋白的,异丙醇是用来沉淀DNA的,混着加的话一部分异丙醇会溶到氯仿异戊醇相中,可能会让蛋白和核酸沉到一起,也可能因为异丙醇量减少会使沉淀的效果差些,上清重加异丙醇试一试吧。个人观点啊
[ Last edited by 进步一点点 on 2013-3-27 at 02:08 ]