木有人咩。。顶一下。。。

最近也要接触这个方面的试验，看看有回复的不

大肠杆菌基因组不是报道过吗？想获得含有全序列glnA 基因的克隆子，直接pcr这个基因不就行了吗，为啥要建库？

就是基于不知道基因碱基的情况下的方法研究，如果直接基因合成就木有意义鸟。。。
个人设想应该是要利用glnA的功能，转入大肠杆菌涂选择平板
目前是不知道怎么设置筛选。。。求指教

你是准备考研的吧？

您好，我想咨询你一下细菌基因文库构建的问题。
我的是一个革兰氏阳性菌，基因组经Sau 3AI不完全酶切后，与BamHI酶切并CIAP处理后的pUC19连接，然后转化DH5a，但是我的转化涂平板长得克隆很少。pUC19切之后跑胶回收条带清晰，没有弥散。感受态细胞验证没有问题，载体自连的话我用了56 ng pUC进行验证，长了几十个菌落。那么您认为是我的连接有问题还是转化有问题呢？
会不会是连接的量太少？我10ul的连接体系里面有30 ng的载体，150 ng左右的插入片段（2-5kb），16度16 h左右，然后全部涂板，但是只长了几十个克隆，太郁闷了，