你用的洗脱剂是什么比例啊，如果比例合适，配置顺序合适，还是有可能配成均一溶液的。

这里还请您参考几个问题：
1.你使用此不互溶的洗脱剂究竟依据什么？TLC结果吗？
2.有没有可能找到其它洗脱系统呢？
3.如果费用不可，可加入一定的有机酸增加互溶性，但同样在一定的比例范围内并要考虑对洗脱效果的影响。

建议：
1.分层的洗脱溶剂最好不要上柱，多半会造成混乱的层析效果，浪费样品。
2.必要时，可考虑换层析材料，

我的实际操作是，按照比例配置好，混匀，取下层，当然最好是能摸索出不分层的比例。

是60：45：10吧，感觉不互溶，混合取下层就可以了吗

可不可以的问题建议你最好跑一个TLC瞧瞧。即使TLC效果可以，也建议你上柱之前最好再考虑一下：

1.干法上柱的话最好采用拌样
2.湿法上柱要考虑好柱床内的溶剂和上样溶剂是否与层析溶剂不相容或可能对层析效果产生干扰。