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铁虫 (初入文坛)

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[求助] H9c2 大鼠心肌细胞培养求助

求助各位师兄师姐，我最近在养h9c2大鼠心肌细胞。

但是从复苏之后的一周时间内，细胞形态会陆续变差，边界不清晰，逐渐变弯曲，以下是从状态良好到逐渐变差的图片。

形态变差之后培养基可见漂浮着较多颜色很浅很小的白色圆球，比死细胞还小，不知是否是细胞碎片。

排查了细胞太稀或者太密，或者吹打用力过大等原因，状态变差的情况未见改善；同细胞房其他同学的细胞状态未见异常，所以感觉污染的可能性也不太大。恳请各位师兄师姐帮忙看下可能是什么原因。

培养条件是meilunbio 高糖dmem培养基，10%fbs，1%双抗，5% 二氧化碳。胰酶1ml 消化1.5min，一般24h细胞密度70%-80%传代1:2。