我做RT-pcr就没有测过RNA浓度，各组浓度相差不大，从内参的起峰循环数就可以看出。就算差点，稀释十倍后也差不到哪去了。当然你不能让各组相差太多，确保各组内参在15个循环左右起峰最好。各组都是拿内参作比较，所以结果木有多大问题。

没有多大问题，但是如果用Delta ct法，最好要标准曲线斜率相近，就是扩增效率要一至，不然结果不可信。因为此法有几个关键假设。如果扩增效率不一至的时候，模板量接近，误差越小。正常情况，扩增效率不会完全一至，所以控制模板量接近，可以最小化误差，