欲用荧光法(FRET)研究BSA与豆豉纤溶酶的相互作用,求合适的方案(20金币)
本人欲研究BSA和豆豉纤溶酶的相互作用,主要是想求得两者在tris-HCL缓冲溶液中的结合常数、结合位点、作用距离等,不行的话求得结合常数也可以
开始欲用荧光猝灭法,但猝灭法多用于BSA与小分子作用,蛋白质之间的作用不太适用,而且最主要的原因是两者都含有色氨酸,激发时都有荧光而形成干扰。
部分文献报道可用荧光共振能量转移(FRET)测得两蛋白质间的作用距离,可选用的外源性荧光是荧光蛋白,有机染料,镧系染料。选用荧光蛋白的话还要用到质粒重装,细胞转染等分子生物学手段,本人是做药学的,对分子生物学这些技术不懂,老板也不可能允许这么做。那就剩下选用有机染料或是镧系染料了,这两者中有没有适合用于研究蛋白质相互作用的呢?
或者有没有其他适合的其他方法?
希望能说的具体一些,你看我也写了一大版!
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友情帮顶吧,不过如果有这个方案,人家愿不愿意给您啊?
就算是纯学术交流吧,应该没有什么损失吧
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纯属学术交流哈