【求助/交流】苏云金芽孢杆菌（BT）质粒转化
小弟刚进入实验室，在做BT的转化（BT-Ecoli穿梭质粒电击转化）时，总是先把质粒转入能去甲基化的大肠杆菌中（如ET，scs110），然后再转化到BT中。按理说细菌的限制修饰系统应该是切割去甲基化的外源DNA，可是为什么在转化时要先人为使质粒去甲基化。而且未去甲基化的载体很难转到BT中（本人并没有试过）。有知道的达人麻烦解惑，不甚感激！
[ Last edited by bitdeng on 2010-7-24 at 10:49 ]
返回小木虫查看更多
今日热帖
京公网安备 11010802022153号
大肠杆菌的修饰系统和Bt的修饰系统不一样，简单而言，构建好的质粒是已经修饰过的质粒（主要有甲基化），去甲基化后更能提高转化效率，bt的宿主菌更容易接受外来DNA。Ps你是哪个学校的也做Bt研究？
我农科院的，刚开始实验，发现很多不明白之处，希望能多多交流！此外，对于BT修饰系统，不知道有没有相关文献，希望不吝赐教。
哦，你是北京植保所的？还是湖北Bt中心的？
你好 我也在做苏云金杆菌质粒转化 转了一年也没转进 可否分享小弟下实验操作方法 不胜感激
，
去甲基化后为什么更能提高转化效率啊？不懂这个怎么回事，能帮忙解释下吗？