转一个e.coli，看看长不长就ok了

线性化就是单酶切，然后整合到酵母的基因组！

你可以同时做一个对照 使用你的酶之外的另一种容易切割的酶和这种酶进行双酶切，这样就能判断是否完全切割吧

[ Last edited by fungixx on 2010-4-9 at 15:43 ]

单酶切后，因为单酶切的质粒为线状构象，而没切开的质粒为环状，电泳能完全分开这两种构象，再回收线性化的条带用于转化就可以了。
也可以取少许酶切样品检测，发现单酶切切得很完全，就可直接用此样品纯化后做转化。

做个电泳就可以了，首先，线性化的质粒跑的比酶切之前的质粒慢，再者，线性化的质粒同MARKER比较，显示的是真实的大小，可以看你质粒大小来区分

我酶切之后的质粒跑的比质粒快，是两条带能分出大小，这个质粒上有两个我用来线性化酶的酶切位点，所以我现在分不清这种情况是不是单酶切的结果。