麦克比浊法确定细菌菌悬液浓度的具体操作步骤是什么啊?有哪位知道,麻烦给一下吧!谢谢各位了。 返回小木虫查看更多
原理:比浊法测菌体浓度:在菌体浓度小时,菌体量(g/L)与光密度OD值成正比 用得最多的就是505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。 具体的g/L和OD之间好像没有具体的数量对应关系,这个恐怕要凭感觉了
好像是的,我记得好像还有个OD多少比多少的比值的,不好意思这个我真能的忘记了,不过你具体需要的浓度还是要通过自己测吸光度来估算的。
是需要测。如果测细菌。简单说来。在细菌培养24小时内。每4小时或者其他时间取样品,用LB平板测定活细菌数量,同时测定培养液的OD 值。等细菌长出后。根基细菌数量和相应OD知理论上就可以做成标准直线了。在以后的试验中,你可以据此,直接得出细菌数,通过OD直线。 但不是所以的微生物都有这种对应关系。
简单来说,就是先做一个菌液浓度与OD值的标准曲线,以后测OD值的话,直接根据标准曲线就知道菌液浓度了。波长的确定,可以拿你的菌液扫个谱,找出吸收峰。一般细菌600nm,但也不一定。 菌液浓度可以取一定体积的菌液,离心收集菌体,测菌体干重。或者涂板计数,也可以用血球计数板计数(不提倡用)。 [ Last edited by susizheng on 2009-11-10 at 20:08 ]
原理:比浊法测菌体浓度:在菌体浓度小时,菌体量(g/L)与光密度OD值成正比
用得最多的就是505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。
具体的g/L和OD之间好像没有具体的数量对应关系,这个恐怕要凭感觉了
谢谢!你的意思是不是说,比如一般细菌浓度为108\ml,OD600下的数值我得自己测才行。请问有这方面的经验吗
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好像是的,我记得好像还有个OD多少比多少的比值的,不好意思这个我真能的忘记了,不过你具体需要的浓度还是要通过自己测吸光度来估算的。
是需要测。如果测细菌。简单说来。在细菌培养24小时内。每4小时或者其他时间取样品,用LB平板测定活细菌数量,同时测定培养液的OD 值。等细菌长出后。根基细菌数量和相应OD知理论上就可以做成标准直线了。在以后的试验中,你可以据此,直接得出细菌数,通过OD直线。
但不是所以的微生物都有这种对应关系。
简单来说,就是先做一个菌液浓度与OD值的标准曲线,以后测OD值的话,直接根据标准曲线就知道菌液浓度了。波长的确定,可以拿你的菌液扫个谱,找出吸收峰。一般细菌600nm,但也不一定。
菌液浓度可以取一定体积的菌液,离心收集菌体,测菌体干重。或者涂板计数,也可以用血球计数板计数(不提倡用)。
[ Last edited by susizheng on 2009-11-10 at 20:08 ]
谢谢!不过必须要做标准曲线吗?似乎有点麻烦啊!呵呵!
谢谢指教!看来大家都说要做标准曲线啊!