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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 麦克比浊法怎么确定细菌菌悬液浓度啊？
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一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)

[交流] 麦克比浊法怎么确定细菌菌悬液浓度啊？

麦克比浊法确定细菌菌悬液浓度的具体操作步骤是什么啊？有哪位知道，麻烦给一下吧！谢谢各位了。
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做个有风度的人
1楼 2009-11-10 16:00:26
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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 11-10 17:15
原理：比浊法测菌体浓度：在菌体浓度小时，菌体量（g／L）与光密度OD值成正比
用得最多的就是505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。

具体的g/L和OD之间好像没有具体的数量对应关系，这个恐怕要凭感觉了
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可以用QQ找我……
2楼2009-11-10 16:18:05
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一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 红多多 at 2009-11-10 16:18:
原理：比浊法测菌体浓度：在菌体浓度小时，菌体量（g／L）与光密度OD值成正比
用得最多的就是505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。

具体的g/L和OD之间好像没有具体的数量对应关系，这个恐怕要凭感觉了

谢谢！你的意思是不是说，比如一般细菌浓度为108\ml，OD600下的数值我得自己测才行。请问有这方面的经验吗？
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做个有风度的人
3楼2009-11-10 16:29:42
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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子
★
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好像是的，我记得好像还有个OD多少比多少的比值的，不好意思这个我真能的忘记了，不过你具体需要的浓度还是要通过自己测吸光度来估算的。
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可以用QQ找我……
4楼2009-11-10 17:20:14
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biocontrol

金虫 (小有名气)
★
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是需要测。如果测细菌。简单说来。在细菌培养24小时内。每4小时或者其他时间取样品，用LB平板测定活细菌数量，同时测定培养液的OD 值。等细菌长出后。根基细菌数量和相应OD知理论上就可以做成标准直线了。在以后的试验中，你可以据此，直接得出细菌数，通过OD直线。
但不是所以的微生物都有这种对应关系。
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裸奔进行时...
5楼2009-11-10 17:37:00
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
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简单来说，就是先做一个菌液浓度与OD值的标准曲线，以后测OD值的话，直接根据标准曲线就知道菌液浓度了。波长的确定，可以拿你的菌液扫个谱，找出吸收峰。一般细菌600nm，但也不一定。
菌液浓度可以取一定体积的菌液，离心收集菌体，测菌体干重。或者涂板计数，也可以用血球计数板计数（不提倡用）。

[ Last edited by susizheng on 2009-11-10 at 20:08 ]
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Thank-you，so-blue.
6楼2009-11-10 20:04:52
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一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by biocontrol at 2009-11-10 17:37:
是需要测。如果测细菌。简单说来。在细菌培养24小时内。每4小时或者其他时间取样品，用LB平板测定活细菌数量，同时测定培养液的OD 值。等细菌长出后。根基细菌数量和相应OD知理论上就可以做成标准直线了。在以后的 ...

谢谢！不过必须要做标准曲线吗？似乎有点麻烦啊！呵呵！
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做个有风度的人
7楼2009-11-12 09:52:16
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一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-11-10 20:04:
简单来说，就是先做一个菌液浓度与OD值的标准曲线，以后测OD值的话，直接根据标准曲线就知道菌液浓度了。波长的确定，可以拿你的菌液扫个谱，找出吸收峰。一般细菌600nm，但也不一定。
菌液浓度可以取一定体积的 ...

谢谢指教！看来大家都说要做标准曲线啊！
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做个有风度的人
8楼2009-11-12 09:57:17
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