荧光问题
做荧光分析时,为确定荧光最大激发波长和发射波长,是不是常先把发射波长设定为0,然后扫描激发波长,得到若干激发峰,然后再依次用得到的不同激发峰的波长为激发光,扫描发射波长,得到那个不随激发光波长而变化的发射峰为最大发射波长,然后依此最大发射峰确定,扫描激发光谱,得到最大激发光?如果如上,为什么一开始要把发射波长设为0呢?请指教,谢谢
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做荧光分析时,为确定荧光最大激发波长和发射波长,是不是常先把发射波长设定为0,然后扫描激发波长,得到若干激发峰,然后再依次用得到的不同激发峰的波长为激发光,扫描发射波长,得到那个不随激发光波长而变化的发射峰为最大发射波长,然后依此最大发射峰确定,扫描激发光谱,得到最大激发光?如果如上,为什么一开始要把发射波长设为0呢?请指教,谢谢
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5楼的请问一下是不是在紫外可见光谱中最大吸收处的波长就可以视为荧光谱中的激发波长,为什么呢
一种化合物的荧光激发光谱的形状,理论上应与其吸收光谱的相同,然而由于荧光仪器的特性,比如光源的能量分布,单色器的透射率和检测器的敏感度都随波长而改变,因而这种表观的激发光谱与吸收光谱的形状都有所差异,在化合物的浓度足够小,对不同波长激发光的吸收正比于其吸光系数,且荧光的量子产率与激发波长无关的条件下,校正后的激发光谱在形状上将于吸收光谱相同,激发波长也与吸收波长最接近.而5楼的方法,我觉得是一种近似的寻找,不能拿来就用,而是以此可以找到发射波长,然后回头再寻找条件下准确的的激发波长.
一块探讨,谢谢,