谁知道考马斯亮蓝的染色原理?
最近在做SDS电泳,实验中出了点问题,我觉得可能是染色有问题,所以很想知道考马斯亮蓝的染色原理,我现在只知道是和蛋白质有反应,具体是和蛋白质怎么反应的?或者是和什么基团有反应啊?? 请教各位高手了! 谢谢
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最近在做SDS电泳,实验中出了点问题,我觉得可能是染色有问题,所以很想知道考马斯亮蓝的染色原理,我现在只知道是和蛋白质有反应,具体是和蛋白质怎么反应的?或者是和什么基团有反应啊?? 请教各位高手了! 谢谢
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The Coomassie dyes binds to proteins via physisorption to arginine, the aromatic amino acids, and histidine
多从胶,染色液,缓冲液上找原因,昨天两块胶都跑花了,换了缓冲液,嘿,好了
悸硭沽晾糋-250是一种染料,在游离状态下呈红色,最大吸收峰在465nm。当它与蛋白质结合后变成深蓝色,最大吸收峰变为595nm。蛋白质含量在1-1000μg范围内,蛋白质-染料复合物在595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法测定。
蛋白质-染料复合物具有很高的吸光值,因此大大提高了蛋白质测定的灵敏度,最低检出量为1μg蛋白。染料与蛋白质结合迅速,大约为2分钟,结合物的颜色在1小时内稳定,
二楼的说考马斯蓝只是和那几个氨基酸物理附着么??有没有什么影响因素能破坏这个附着的?
三楼的 我的情况是其他样品都能跑出来,就有其中一个样品没有任何条带,但是样品是有酶活的! 所以很奇怪,想不明白!
四楼的,呵呵,这个方法我昨天也查到了,就是不知道具体和蛋白质怎么反应,所以才问的!呵呵
谢谢各位了,呵呵!继续请各位高手指点啊