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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 谁知道考马斯亮蓝的染色原理？
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skyme17

铁虫 (小有名气)

[交流] 谁知道考马斯亮蓝的染色原理？

最近在做SDS电泳，实验中出了点问题，我觉得可能是染色有问题，所以很想知道考马斯亮蓝的染色原理，我现在只知道是和蛋白质有反应，具体是和蛋白质怎么反应的？或者是和什么基团有反应啊？？  请教各位高手了！ 谢谢
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1楼 2008-04-09 22:22:34
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huang1962

银虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
The Coomassie dyes binds to proteins via physisorption to arginine, the aromatic amino acids, and histidine
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2楼2008-04-09 23:06:13
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):有详细介绍就好了
多从胶，染色液，缓冲液上找原因，昨天两块胶都跑花了，换了缓冲液，嘿，好了
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3楼2008-04-09 23:18:11
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wzh0209

木虫 (正式写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
考马斯亮兰G-250是一种染料，在游离状态下呈红色，最大吸收峰在465nm。当它与蛋白质结合后变成深蓝色，最大吸收峰变为595nm。蛋白质含量在1-1000μg范围内，蛋白质-染料复合物在595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比，故可用比色法测定。
蛋白质-染料复合物具有很高的吸光值，因此大大提高了蛋白质测定的灵敏度，最低检出量为1μg蛋白。染料与蛋白质结合迅速，大约为2分钟，结合物的颜色在1小时内稳定.
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4楼2008-04-10 10:45:41
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skyme17

铁虫 (小有名气)
二楼的说考马斯蓝只是和那几个氨基酸物理附着么？？有没有什么影响因素能破坏这个附着的？
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5楼2008-04-10 11:41:39
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skyme17

铁虫 (小有名气)
三楼的  我的情况是其他样品都能跑出来，就有其中一个样品没有任何条带，但是样品是有酶活的！ 所以很奇怪，想不明白！
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6楼2008-04-10 11:42:53
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skyme17

铁虫 (小有名气)
四楼的，呵呵，这个方法我昨天也查到了，就是不知道具体和蛋白质怎么反应，所以才问的！呵呵
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7楼2008-04-10 11:43:48
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skyme17

铁虫 (小有名气)
谢谢各位了，呵呵！继续请各位高手指点啊
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8楼2008-04-10 11:44:36
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skyme17

铁虫 (小有名气)
我顶  不能沉啊   问题还没解决呢   呵呵
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9楼2008-04-10 22:16:14
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潘阳

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
考马斯亮蓝有2个SO3H基团，偏酸性，可以和蛋白质的碱性基团结合。（若不信可参考《蛋白质电泳实验技术》63页）
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10楼2011-08-19 16:54:38
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