荧光分析倍频峰怎样消除
荧光,又作“萤光”,是一种冷光。对于专业人事并不陌生!当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。普通荧光仪有日立公司生产的F2500,F4500系列,我们知道一般光在激发于发射的过程中会有一个能量的损失,这在仪器上就表现为其斯托克位移的的变化,就一般染料而言,斯托克位移较小,一般不会出现倍频峰的存在,而对于斯托克位移较大的荧光物质,肯定会有一倍频的影响,既在激发波长二倍的地方会出现一很强的峰,同志们请注意这不是你的荧光峰,而是一无用的干扰峰,他会随着激发波长的变化而变化,也不是散射峰,其机理较为复杂,这里不做解释.
怎样寻找最佳激发和最佳发射波长是我们认识这一问题的前提,其实很简单,F4500上就有一3D-SCan的功能,能很快找到最佳激发和发射.
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不明白LZ想说什么?
实在是不懂搂住什么意思!!!!
倍频峰虽然比不上散射峰,但它也是散射峰中的一种,也可以作为一种分析的手段,它的确被人们一直视为有碍于荧光分析的干扰,但是利用(λem=2λex,λem=1/2λex,λem=λex)三者同时结合分析,效果也是可见的,
我也是用f4500做荧光试验的,支持一下
我们一般是这样做的:
1.找发射峰的时候,设激发是 Ex, 扫描的范围是:(Ex+20)~(2Ex-20)。
2.找激发峰的时候,设发射是 Em,扫描的范围是:(0.5Em+20)~(Em-20)。
用同步荧光扫描,只有单峰,不会有倍频峰
我也要用到荧光,谢谢!