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求助:测定多糖的蒽酮比色法的具体步骤是什么?

作者 猜猜我是谁
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我现在需要测定溶液中的多糖浓度,在网上查到应该用蒽酮比色法来做,但没有具体步骤以及溶液的浓度的配方,望哪位做过这方面的高手给指导一下,非常感谢! 返回小木虫查看更多

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  • 开心果子

    蒽酮比色法,糖在硫酸的作用下生成糖醛,糖醛再与蒽酮作用,形成一种绿色的络合物,颜色的深浅与糖含量有关。  
    1.  葡萄糖标准溶液:称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg,配制成500ml溶液,即得每ml含糖为200μg的标准溶液。
      蒽酮试剂:称取1g经过纯化的蒽酮,溶解于1000ml稀硫酸中即得。硫酸溶液由760ml浓硫酸(比重1.84)稀释成1000ml而成。
    2.显色及比色
     吸取上述糖提取液1ml,放入一干洁的试管中,加蒽酮试剂5ml混合之,于沸水浴中煮沸10分钟,取出冷却,然后于分光光度计上进行测定,波长为625nm,测得吸光度。从标准曲线上查得滤液中的糖含量(或经直线回归公式计算),然后再行计算样品中含糖百分数。
      3.绘制标准曲线
      取标准葡萄糖溶液将其释成一系列不同浓度的溶液,浓度分别为每ml含糖0、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg。按上述方法分别测得其吸光度,然后绘制A026-糖浓度曲线,或进行直线回归求得直线方程。
      4.计算样品中含糖%
      设V为植物样品稀释后的体积(ml)
      C为提取液的含糖量(μg/ml)
      W为植物组织鲜重(g)
      则得计算式如下:可溶性糖含量% =C×V/W×106 ×100%,

  • 开心果子

    蒽酮比色法,糖在硫酸的作用下生成糖醛,糖醛再与蒽酮作用,形成一种绿色的络合物,颜色的深浅与糖含量有关。  
    1.  葡萄糖标准溶液:称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg,配制成500ml溶液,即得每ml含糖为200μg的标准溶液。
      蒽酮试剂:称取1g经过纯化的蒽酮,溶解于1000ml稀硫酸中即得。硫酸溶液由760ml浓硫酸(比重1.84)稀释成1000ml而成。
    2.显色及比色
     吸取你所提取多糖溶液1ml,放入一干洁的试管中,加蒽酮试剂5ml混合之,于沸水浴中煮沸10分钟,取出冷却,然后于分光光度计上进行测定,波长为625nm,测得吸光度。从标准曲线上查得滤液中的糖含量(或经直线回归公式计算),然后再行计算样品中含糖百分数。
    3.绘制标准曲线
      取标准葡萄糖溶液将其释成一系列不同浓度的溶液,浓度分别为每ml含糖0、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg。按上述方法分别测得其吸光度,然后绘制A026-糖浓度曲线,或进行直线回归求得直线方程。
    4.计算样品中含糖%
      设V为样品稀释后的体积(ml)
      C为提取液的含糖量(μg/ml)
      W为样品干重(g)
      则得计算式如下:可溶性糖含量% =C×V/W×106 ×100%

  • 猜猜我是谁

    太感谢了,可惜我是新虫,不能给您们金币,但我从内心里非常感谢您们的指导,谢谢!

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