请教各位师兄师姐,怎样克隆高GC含量的基因,比如克隆链霉菌的基因,如果不用专用的Taq酶和Buffer。我试过在反应体系中加不同浓度的DMSO和甘油,都没有结果,请问大家有其他好的建议吗? 返回小木虫查看更多
你可以试试提高退火温度。
退火温度影响可能比较小,你可以试试,我一般都用甜菜碱。效果好于DMSO
我都要放弃了,谢谢二位给我的宝贵意见,我会再摸索条件!非常感谢!
试一试takala的扩增GC专用的TAQ酶啊!
谢谢版主和各位对我的鼓励!
呵呵,我用GC buffer 扩的高GC含量的片段,效果不错啊,我扩的启动子,这种BUFFER好像55元左右一只,建议试一下哦,如果需要,我把反应体系给你,QQ:375759369,
对,除了退火温度升高外,有专门的适合gc含量高的gc buffer 可以试试。
你可以试试提高退火温度。
退火温度影响可能比较小,你可以试试,我一般都用甜菜碱。效果好于DMSO
我都要放弃了,谢谢二位给我的宝贵意见,我会再摸索条件!非常感谢!
试一试takala的扩增GC专用的TAQ酶啊!
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呵呵,我用GC buffer 扩的高GC含量的片段,效果不错啊,我扩的启动子,这种BUFFER好像55元左右一只,建议试一下哦,如果需要,我把反应体系给你,QQ:375759369,
对,除了退火温度升高外,有专门的适合gc含量高的gc buffer 可以试试。