版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chhcll

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 624.6
帖子: 59
在线: 6.5小时
虫号: 4216172
注册: 2015-11-13
专业: 植物遗传学

[交流] PCR扩增产物送测序中止，信号太弱怎么办

我做的是植物DNA条形码，但是每次PCR产物送公司测序时有一些产物信号太弱，出现中止的现象，可是我所有产物扩增体系都是一样的，DNA模板1.5微升，上下游引物各0.4微，MIX混合酶9.8微，加双蒸水到20微升的体系。
PCR也扩增出来了，请问是什么原因导致的呢？谢谢大家啦。这个是我的PCR扩增胶图

PCR扩增产物送测序中止，信号太弱怎么办

发自小木虫Android客户端

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

测序遇到poly结构后双峰问题已经有2人回复
请大神帮分析下测序结果拜托了已经有1人回复
单引物扩增已经有5人回复
关于重组质粒已经有5人回复
Tail-pcr相关问题已经有0人回复
细菌16S测序诡异的现象已经有11人回复
诡异的overlap PCR实验现象，pcr后大片段消失了已经有2人回复
测序失败已经有0人回复
自己悲催也就够了，还还得同学悲剧——感受态坑死人已经有12人回复
求助，关于pcr扩增后产物序列在ncbi上的比对，以及3' race接头引物的设计。。已经有6人回复
PCR产物回收测序问题已经有5人回复
求助：PCR扩增片段测序结果引物中间多出150bp的片段已经有5人回复
请教一个基因的扩增，TA克隆问题已经有6人回复
未知基因片段的钓取讨论，恳请大家帮我分析分析已经有6人回复

1楼 2016-01-08 10:42:47

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

angelyou

铁虫 (小有名气)

应助: 28 (小学生)
金币: 292
帖子: 171
在线: 65.1小时
虫号: 1625043
注册: 2012-02-18
专业: 植物病理学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

建议送克隆菌液测，另外的话，可以试试换家测序公司，亲身经验，某家公司测不出来的送给另一家给测出来了

发自小木虫IOS客户端

9楼2016-01-12 01:18:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 9 个回答

shuhangyu

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 6
帖子: 11
在线: 2.2小时
虫号: 2517209
注册: 2013-06-22
专业: 兽医传染病学

next one

发自小木虫Android客户端

3楼2016-01-08 13:27:49

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lifechuteng

新虫 (小有名气)

应助: 62 (初中生)
金币: 504.5
红花: 12
帖子: 143
在线: 38.5小时
虫号: 3948241
注册: 2015-07-01
专业: 生物物理、生物化学与分子

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

信号弱说明荧光标记的ddNTP没有跟模板结合释放荧光，有可能是由于模板高级结构产生这种结果，您可以尝试反向也测序一下，或者连载体之后进行测序。

赞一下(1人)

4楼2016-01-08 13:55:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

反应链

新虫 (正式写手)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 397.3
散金: 339
红花: 16
帖子: 358
在线: 183.1小时
虫号: 3334128
注册: 2014-07-22
性别: GG
专业: 免疫学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

The standard process for DNA products sequenced, includes TA-cloning which can avoid your problem appearing.

5楼2016-01-08 15:21:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 9 个回答