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单引物扩增 已有2人参与
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测序公司说是典型的单引物扩增产物，只有上游引物：C（GGATCC）ATGCCCCCTCGC引物起作用，引物需要重新设计 我不明白的是即使是单引物扩增，也应该会有部分可以匹配上才对，可结果一点也不能和已知序列匹配。而且我送样前做的PCR和双酶切都是可以的。哎.....做个实验各种状况都能遇见，我也是醉了........ 我是用的PMD19-T载体，上游引物：C（GGATCC）ATGCCCCCTCGC 括号内为bamH1内切酶位点。 下游引物：C（GAGCTC）CTAGCTCACGGTCTTGCC 括号内为Sac I内切酶位点。退火温度61度。 |
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