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测序遇到poly结构后双峰问题
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大家好，本人最近做一段基因的扩增预测序，但遇到了poly结构后双峰的问题。具体情况如下： 1、首先是直接PCR后用PCR产物直接送生物公司（英骏）测序，结果上游反应在poly A（约26个A）后出现移码双峰，下游一样的在26个T后双峰； 2、PCR产物连接载体后导入感受态细胞中，挑选阳性克隆培养菌液，将菌液寄送公司，结果上游在poly A（约23个A）后出现移码双峰，下游一样的在23个T后双峰； 由于该基因位于蛋白质编码基因处，所以须高清poly 数，所以在此向大家请教，有遇到过此情况或了解该情况的大神帮忙支支招，谢谢了！ |
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