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测序遇到poly结构后双峰问题
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大家好,本人最近做一段基因的扩增预测序,但遇到了poly结构后双峰的问题。具体情况如下: 1、首先是直接PCR后用PCR产物直接送生物公司(英骏)测序,结果上游反应在poly A(约26个A)后出现移码双峰,下游一样的在26个T后双峰; 2、PCR产物连接载体后导入感受态细胞中,挑选阳性克隆培养菌液,将菌液寄送公司,结果上游在poly A(约23个A)后出现移码双峰,下游一样的在23个T后双峰; 由于该基因位于蛋白质编码基因处,所以须高清poly 数,所以在此向大家请教,有遇到过此情况或了解该情况的大神帮忙支支招,谢谢了! |
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