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PCR后琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢？已有7人参与
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| 各位大侠，新手最近因实验需要基因鉴定进行PCR后电泳，目的基因在290-370bp之间，目前用的100bp ladder,1%琼脂糖，跑了几次后发现 ladder在目的段跑的不是很开，区分不大，不知道琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢？鉴于经验有限，再次请教各位，期待大家的建议与指导~~！~O(∩_∩)O~ |
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oliviashane
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你微波加熱時應該給燒杯口留出一個縫隙，這樣蒸汽可以排出，否則過於密封，加熱沸騰凝膠液會溢出?恚孔匀痪蜕倭恕Ｎ抑熬褪且驗橛帽ｕr膜封的太嚴�?了，加熱沸騰凝膠液都溢出?砹耍ｐN的就很少了。 发自小木虫IOS客户端 |
10楼2015-12-17 01:49:42
z631535213
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【答案】应助回帖
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我PCR产物长度为180bp左右，选用的Mark为50bp。胶用的2.5%，电压一般是按电极丝之间的距离来算。加热之前连瓶子带溶液称重一次，加热溶解结束后在称重，补水至原重量。加热的时候用保鲜膜密封单层，然后用移液枪头在保鲜膜上扎洞保持和外界大气压相通 发自小木虫IOS客户端 |
12楼2015-12-17 07:03:30
oliviashane
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膠的?舛扰c目的基因的大小有關，bp數大的用?舛鹊偷哪z跑，阻力小跑的快，反之bp數小的就用高?舛鹊哪z，跑得慢，條帶分離的清楚。 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2015-12-16 01:44:37
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maker的大小是固定的，与胶浓度没有关系；maker跑不开可以多跑会或者换浓度大的胶 发自小木虫Android客户端 |
7楼2015-12-16 22:56:35
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多跑会，稍微加大浓度，制胶过程规范点 发自小木虫IOS客户端 |
8楼2015-12-16 23:10:12
shanyue00
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可以用4%的胶试试，他可以把150bp和130左右的bp分开 发自小木虫Android客户端 |
9楼2015-12-16 23:12:05