应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR后琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
453/5返回列表上一页12345下一页
查看: 3938  |  回复: 44
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

z631535213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 1202ld at 2015-12-17 13:42:09
一般跑20, 50bp的，我都用TAE 75v~80v 1h10分钟，3%的胶，有时4%
...

胶浓度高点好像是好些，前几次跑胶的时候用的是实验书上建议的2%，发现不太好，然后选用厂家说明书上的浓度

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
21楼2015-12-17 13:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1202ld

新虫 (初入文坛)
肯定是要按照说明书上的，因为如果你跑不好它的产品不就没人买了吗？takara等等这些公司的产品目录有详细的片段大小与胶浓度选择方案，可以根据此选择与试验。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
22楼2015-12-17 13:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JULIA606

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 暮色西荷 at 2015-12-16 22:56:35
maker的大小是固定的，与胶浓度没有关系；maker跑不开可以多跑会或者换浓度大的胶

这不是前后矛盾了么。。。浓度。。
赞一下 回复此楼
23楼2015-12-17 17:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JULIA606

新虫 (小有名气)
???????:
10?: Originally posted by oliviashane at 2015-12-17 01:49:42
????????r????o??????????????p????@?????????????????t?^?????????v???z?????????????????????????????????????r?????????????????v???z?????????????N?????????
...

??????????????????????????????????????????????????????????ǹ?????????????????????????????????
赞一下 回复此楼
24楼2015-12-17 18:00:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JULIA606

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by z631535213 at 2015-12-17 07:03:30
我PCR产物长度为180bp左右，选用的Mark为50bp。胶用的2.5%，电压一般是按电极丝之间的距离来算。加热之前连瓶子带溶液称重一次，加热溶解结束后在称重，补水至原重量。加热的时候用保鲜膜密封单层，然后用移液枪头在 ...

今天也是这样做胶的，但感觉还是不太好：微波后胶依然有溢出量有减少，按重量补水后玻璃棒搅拌，感觉胶的状态不是很均匀，不知道是不是在凝的原因。还有什么建议吗？感谢赐教！
赞一下 回复此楼
25楼2015-12-17 18:20:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JULIA606

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by z631535213 at 2015-12-17 07:06:47
还有不要用一次性手套，那是双层的，扎空的话加热过程中上下孔会移动，可以处理一下弄个单层的

之前用的一次性手套也是单层的，是透明的PE材质的那种，就是手套罩起来确实会积攒一些胶液
赞一下 回复此楼
26楼2015-12-17 18:22:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JULIA606

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by lvsecaihong at 2015-12-17 09:11:51
我的片段在280bp左右，用的是2%的琼脂糖胶。效果还好。你加热溶琼脂糖的时候用锡纸包住瓶口，微波炉打两分钟就好，溶液少不了多少。

2min真心溶不彻底啊。。。多次加热溶胶后还是可见胶冻状的残留。。还是用锡纸封口后会有这种不一样的效果？
赞一下 回复此楼
27楼2015-12-17 18:24:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JULIA606

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by joeming123 at 2015-12-17 12:04:00
用2%或者2.5%的琼脂糖胶（2g或2.5g胶粉+100ml 1xTAE）.煮沸几次，至胶溶液中没有固体为止。

用一般的电泳仪120v。1h左右就行。

今天试了2%琼脂糖胶（1.6g胶粉+80ml1*TAE），电压100V,跑了1H,结果ladder跑的根本不能看。。。
赞一下 回复此楼
28楼2015-12-17 18:26:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

z631535213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
25楼: Originally posted by JULIA606 at 2015-12-17 18:20:07
今天也是这样做胶的，但感觉还是不太好：微波后胶依然有溢出量有减少，按重量补水后玻璃棒搅拌，感觉胶的状态不是很均匀，不知道是不是在凝的原因。还有什么建议吗？感谢赐教！...

玻棒搅拌后放微波炉里再稍微加热下就可以了，溢出的话的人在旁边看着，看快溢出了就停止加热，2S后继续加热。我就是这样的。180ml的胶用锥形瓶加热，人都在微波炉边看着的，每次加热都有致密的气泡产生，容易溢出

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
29楼2015-12-17 18:27:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JULIA606

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 1202ld at 2015-12-17 12:50:10
50bp 胶浓度要3%或以上，不然成一堆分不开
...

“成一堆分不开”指的是ladder跑不开吗？可是之前1%的胶跑的确实比现在能看多了。。。我需要的鉴别条带差别70bp
赞一下 回复此楼
30楼2015-12-17 18:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 JULIA606 的主题更新
453/5返回列表上一页12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-04-01 9/450 2026-04-03 01:25 by 小饼干学姐0
[考研] 302求调剂 +9 zyx上岸！ 2026-04-02 9/450 2026-04-02 23:07 by 马儿快快地跑
[考研] 085601一志愿北理325分求调剂 +4 找调剂，， 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by dongzh2009
[考研] 319求调剂 +16 太容易1018 2026-04-01 16/800 2026-04-02 20:12 by seattle40
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 264分，求任意工科调剂 +4 zzlqwq 2026-03-29 5/250 2026-04-02 17:17 by 何曾几何
[考研] 321求调剂 一志愿 浙江工业大学生物医药 +5 嘿嘿HC 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:23 by sophie2180
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:10 by yulian1987
[考研] 311求调剂 +14 蓝月亮亮 2026-03-30 14/700 2026-04-02 12:18 by 1753564080
[考研] 324分 085600材料与化工 +20 呆鹅oor 2026-03-27 20/1000 2026-04-02 10:13 by oooqiao
[考研] 各位老师好，我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +13 Koxui 2026-03-28 13/650 2026-04-02 09:35 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 274求调剂 +8 薛定谔的虎。 2026-04-01 8/400 2026-04-02 09:21 by 晴空210210
[考研] 求调剂 +5 零八# 2026-03-27 5/250 2026-04-01 14:40 by yulian1987
[考研] 311（085601）求调剂 +12 liziyeyeye 2026-03-28 13/650 2026-04-01 00:34 by fmesaito
[考研] 315求调剂 +6 akie... 2026-03-28 7/350 2026-03-31 16:48 by asdfzly
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-27 10/500 2026-03-31 13:35 by Huaxue_Wang
[考研] 262求调剂 +7 ZZ..000 2026-03-30 8/400 2026-03-31 10:05 by cal0306
[考研] 抱歉 +4 田洪有 2026-03-30 4/200 2026-03-30 21:26 by mumin1990
[考研] 081200-314 +3 LILIQQ 2026-03-27 4/200 2026-03-28 09:41 by 保护地球你我做�
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭