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JULIA606

新虫 (小有名气)

[求助] PCR后琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢? 已有7人参与

各位大侠,新手最近因实验需要基因鉴定进行PCR后电泳,目的基因在290-370bp之间,目前用的100bp ladder,1%琼脂糖,跑了几次后发现 ladder在目的段跑的不是很开,区分不大,不知道琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢?鉴于经验有限,再次请教各位,期待大家的建议与指导~~!~O(∩_∩)O~
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JULIA606

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by z631535213 at 2015-12-17 07:03:30
我PCR产物长度为180bp左右,选用的Mark为50bp。胶用的2.5%,电压一般是按电极丝之间的距离来算。加热之前连瓶子带溶液称重一次,加热溶解结束后在称重,补水至原重量。加热的时候用保鲜膜密封单层,然后用移液枪头在 ...

今天也是这样做胶的,但感觉还是不太好:微波后胶依然有溢出量有减少,按重量补水后玻璃棒搅拌,感觉胶的状态不是很均匀,不知道是不是在凝的原因。还有什么建议吗?感谢赐教!
25楼2015-12-17 18:20:07
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oliviashane

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-12-17 15:03:02
膠的?舛扰c目的基因的大小有關,bp數大的用?舛鹊偷哪z跑,阻力小跑的快,反之bp數小的就用高?舛鹊哪z,跑得慢,條帶分離的清楚。

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-12-16 01:44:37
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JULIA606

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by oliviashane at 2015-12-16 01:44:37
膠的?舛扰c目的基因的大小有關,bp數大的用?舛鹊偷哪z跑,阻力小跑的快,反之bp數小的就用高?舛鹊哪z,跑得慢,條帶分離的清楚。

打算试试不同浓度的胶跑跑ladder看
3楼2015-12-16 08:44:16
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Heao_

新虫 (初入文坛)

4楼2015-12-16 11:09:46
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