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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR后琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢？
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JULIA606

新虫 (小有名气)

[求助] PCR后琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢？ 已有7人参与

各位大侠，新手最近因实验需要基因鉴定进行PCR后电泳，目的基因在290-370bp之间，目前用的100bp ladder,1%琼脂糖，跑了几次后发现 ladder在目的段跑的不是很开，区分不大，不知道琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢？鉴于经验有限，再次请教各位，期待大家的建议与指导~~！~O(∩_∩)O~
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1楼 2015-12-15 20:15:48
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z631535213

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我PCR产物长度为180bp左右，选用的Mark为50bp。胶用的2.5%，电压一般是按电极丝之间的距离来算。加热之前连瓶子带溶液称重一次，加热溶解结束后在称重，补水至原重量。加热的时候用保鲜膜密封单层，然后用移液枪头在保鲜膜上扎洞保持和外界大气压相通

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12楼2015-12-17 07:03:30
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oliviashane

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-12-17 15:03:02
膠的?舛扰c目的基因的大小有關，bp數大的用?舛鹊偷哪z跑，阻力小跑的快，反之bp數小的就用高?舛鹊哪z，跑得慢，條帶分離的清楚。

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2楼2015-12-16 01:44:37
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JULIA606

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by oliviashane at 2015-12-16 01:44:37
膠的?舛扰c目的基因的大小有關，bp數大的用?舛鹊偷哪z跑，阻力小跑的快，反之bp數小的就用高?舛鹊哪z，跑得慢，條帶分離的清楚。

打算试试不同浓度的胶跑跑ladder看
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3楼2015-12-16 08:44:16
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Heao_

新虫 (初入文坛)
我觉得换个电压试试看

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4楼2015-12-16 11:09:46
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