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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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JULIA606

新虫 (小有名气)

[求助] PCR后琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢?已有7人参与

各位大侠,新手最近因实验需要基因鉴定进行PCR后电泳,目的基因在290-370bp之间,目前用的100bp ladder,1%琼脂糖,跑了几次后发现 ladder在目的段跑的不是很开,区分不大,不知道琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢?鉴于经验有限,再次请教各位,期待大家的建议与指导~~!~O(∩_∩)O~
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JULIA606

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Heao_ at 2015-12-16 11:09:46
我觉得换个电压试试看

Protocol上给的是120V 1h,我都是跑了50min左右,查了一些说法是:根据正负极间的距离5-8V/cm,但是不明白的地方是这个距离是指垂直距离还是直线距离呢。。。我用的电泳槽正负极间的垂直距离12cm+。查看说是跑的慢条带会比较清楚好看。
5楼2015-12-16 22:03:26
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oliviashane

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-12-17 15:03:02
膠的?舛扰c目的基因的大小有關,bp數大的用?舛鹊偷哪z跑,阻力小跑的快,反之bp數小的就用高?舛鹊哪z,跑得慢,條帶分離的清楚。

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-12-16 01:44:37
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JULIA606

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by oliviashane at 2015-12-16 01:44:37
膠的?舛扰c目的基因的大小有關,bp數大的用?舛鹊偷哪z跑,阻力小跑的快,反之bp數小的就用高?舛鹊哪z,跑得慢,條帶分離的清楚。

打算试试不同浓度的胶跑跑ladder看
3楼2015-12-16 08:44:16
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Heao_

新虫 (初入文坛)

4楼2015-12-16 11:09:46
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