| 查看: 2232 | 回复: 19 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
要表达蛋白，构建重组质粒，好几次不成功 已有7人参与
|
|||
|
要表达蛋白，构建重组质粒，我设计的酶切引物上只有酶切位点6个碱基，无论如何都连不上，是因为与质粒的同源壁太短么？我的片段长两千五百bp。我该怎么设计引物，同源壁要多长？ 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有50人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关pPICZA、pPIC9K酵母表达质粒如何正确构建载体表达蛋白
已经有6人回复
- 看到的一篇有关重组蛋白的纯化方法的文章，还有案例介绍说的！！
已经有2人回复
- 评审意见，唉
已经有88人回复
- 关于真核生物表达系统的一些问题
已经有10人回复
- 帮忙毕业翻译！！！万分感谢，自己英语不好！
已经有4人回复
- 关于重组菌蛋白表达后镍柱纯化脱盐后的一个问题
已经有8人回复
- 崩溃！！易错pcr重组质粒构建总是失败！！求大神指导！
已经有8人回复
- 质粒DNA的分离、纯化和鉴定
已经有32人回复
- 如何在丝状真菌中表达如何蛋白
已经有3人回复
- 构建重组载体
已经有4人回复
- promeg体外翻译系统：如何构建EGFP和特定基因的重组质粒
已经有1人回复
- 请问建立竞争ELISA（competitive ELISA）方法需要使用多少纯话的标准蛋白？
已经有6人回复
- 两种重组质粒的重新构建问题
已经有1人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 多个亚基蛋白 ORF串联表达
已经有9人回复
- 用于表达的重组载体构建后需要测序吗？
已经有6人回复
- 【资料】续：众多生物信息学数据库，总有你需要的，
已经有23人回复
xl0071334
至尊木虫 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 38 (小学生)
- 金币: 11336.2
- 红花: 7
- 帖子: 2717
- 在线: 315.8小时
- 虫号: 1057964
- 注册: 2010-07-15
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
★
向日21(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:25:30
向日21(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:25:30
|
楼主的引物没有保护碱基，所以PCR产物没有切开，如果不换引物的话，建议先连T载体 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-01-05 07:09:49
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
向日21(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:25:04
感谢参与，应助指数 +1
向日21(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:25:04
|
你的片段不长，应该问题不大，可能原因有几个：第一，酶切位点前一般需要设置保护碱基，第二，你做酶切反应时，没有切开，第三，连接效率不高，第四，你的切好的载体有问题，第五，酶切时时间太长，片段切碎了。供参考 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2015-12-06 10:22:19
3楼2015-12-06 10:39:46
曼陀罗的祈祷
金虫 (正式写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 1282.3
- 散金: 50
- 红花: 7
- 帖子: 494
- 在线: 187.2小时
- 虫号: 2660284
- 注册: 2013-09-13
- 性别: MM
- 专业: 水产学
4楼2016-01-04 22:41:51
