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A张盈

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助RNA提取电泳图分析 已有4人参与

有哪位大神帮忙分析下,我是提的放线菌中的RNA,第一个胶孔是2000的maker,总感觉跑出的条带对应的大小不太对,哪位大神帮忙分析下,谢谢
求助RNA提取电泳图分析
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A张盈

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 然处 at 2015-09-29 16:58:58
rna有些降解,分子大小的话,用marker对比也不太正确,毕竟dna和rna还有有结构上的差别的

应该是大部分是降解了,我用的DNA  2000的maker
5楼2015-09-29 19:08:15
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A张盈

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dorecnu at 2015-09-29 17:08:10
理想的RNA提取条带应该是三条28S,18S,5S亮度上应该依次减弱28S最亮,18S次之,5S最弱。但是在实际试验中我们往往只能获得两条条带,这取决于你后续的实验精度要求,如果是普通的定量PCR的话,我倒是建议你先将这个R ...

好的,谢谢您
6楼2015-09-29 19:09:13
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A张盈

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by DanceMacabre at 2015-09-29 17:55:46
胶的浓度,配1.5的胶。电泳时间,3min。RNA提取过程,在冰上低温;加乙醇洗涤后,加水溶解时,在超净台搞。做实验时,穿实验服,戴口罩。结果包你满意。

胶的浓度用的1%的胶,电泳时用的80V,将近40min
7楼2015-09-29 19:12:32
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A张盈

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by DanceMacabre at 2015-09-29 19:29:53
电泳条件就用你实验室常规跑质粒的条件,一般是跑1地暖yig0-15min对应的那个电压电流。跑RNA时只跑3-5min。切记。跑久了,
...

好的  我试试看   特别感谢
10楼2015-09-29 21:06:51
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A张盈

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by liping121200 at 2015-09-30 17:12:09
3楼说的比较好,你提的RNA降解的比较厉害,可以先试着做后续的实验,我之前提的也有降解的,有的也是可以用的,如果没有结果,重新提取RNA过程中在4度离心时速度要大一点,我们一般是12000转,这样会减少杂质的残留 ...

好的  谢谢楼主  耐心的解析
14楼2015-10-01 15:02:46
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