24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4375  |  回复: 3

rogersgene

木虫 (小有名气)

[求助] 求助各位前辈分析一下这张大肠杆菌质粒提取电泳图 已有1人参与

这是我们大三的分子生物学实验。
材料:大肠杆菌,提前震荡12h。
方法:碱裂解法
Marker: 2k,在最右边。
琼脂糖凝胶电泳,电泳电压165v。
备注: 在加入溶液I II III后,略去了加氯仿异戊醇这一步,而是直接离心,转移上清进行后续步骤。
我的问题是,1.上方的红框内是其他同学做的,泳道下部有非常明显的涂抹状的带,是rna吗,如果是,是不是因为没加rna酶所致?2.下方红框的6个泳道是我们做的,请问自上而下,箭头所指的三条带各是什么?我的理解是:自上而下:开环质粒,超螺旋质粒,rna。(网上说碱裂解法线性质粒少)3.我怀疑最上面的箭头所指的带含有基因组dna。4.右上角右一泳道的两条恰好分开的带合是什么?
这是第一次发帖,本科生刚刚接触分子,经验匮乏,
还请多多指教!

求助各位前辈分析一下这张大肠杆菌质粒提取电泳图


发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

反应链

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1. The smear bands with hypersensitivity as your mentioned have the greater molecular weight than RNA contamination which is less than 100bp in size. I believe that these are impurities, such as proteins and polysaccharides, migrating from the lower wells.  

2. The relaxed circular molecular form, and the full-length linear molecular form of the uncut plasmid usually run very close together and are not always resolved from one another. The upper band is the combination of relaxed circular molecules and full-length linear molecules. You are right on the other bands.

3. The genomic DNA is 23kb or greater in size. In general, it is easy to separate the gDNA molecules and plasmid molecules on an agarose gel.

4. They are the relaxed circular molecules and the full-length linear molecules running as separate bands.

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : UCSC_CoreLab_--_Supercoiled_DNA_on_Gels.pdf
  • 2015-12-30 16:58:41, 75.92 K

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-12-30 16:58:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rogersgene

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2015-12-30 16:58:43
1. The smear bands with hypersensitivity as your mentioned have the greater molecular weight than RNA contamination which is less than 100bp in size. I believe that these are impurities, such as prot ...

英文的回复,好厉害!我读懂您的意思了,非常感谢!送上红花一朵!但我想请问,为什么超螺旋质粒的量那么少呢?超螺旋状态不就是我们需要的吗?是本来就这么少,还是我们提取水平的问题?

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-12-30 18:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ayumi7667

新虫 (初入文坛)

????????С????????_plasmid??С ???D?????????l??????????|?w ????????B??o???A?y??С???????????????K????????????????????????z??С???_????l???????????? ?????摪??RNA ??????RNase ???

????С???Android?????
4楼2015-12-30 21:05:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rogersgene 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学308分求调剂 +15 你好明天你好 2026-04-07 17/850 2026-04-08 08:50 by oooqiao
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
[考研] 农学,求调剂,314分 +4 访客记录可爱 2026-04-04 4/200 2026-04-07 21:07 by 等岸
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
[考研] 334分机械专硕求调剂 +3 蛋花紫菜汤 2026-04-03 3/150 2026-04-07 14:49 by 逍遥cocoa
[考研] 考研调剂 +3 Wwwwwww哇 2026-04-06 3/150 2026-04-06 20:55 by lbsjt
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +7 晚风不晚 2026-04-04 7/350 2026-04-06 14:06 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂325分 +12 15771691647 2026-04-04 13/650 2026-04-06 12:00 by lijunpoly
[考研] 一志愿C9的化学工程(085602) 340分,感觉校内调剂无望,求调剂 +12 万事宜臻 2026-04-04 12/600 2026-04-06 07:46 by 无际的草原
[考研] 326求调剂 +3 顾若浮生 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:32 by 蓝云思雨
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 11/550 2026-04-04 23:37 by 永字号
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +6 朔朔话 2026-04-02 7/350 2026-04-04 19:16 by 蓝云思雨
[考研] 11408,284分,二战真诚求调剂 +4 12.27 2026-04-02 4/200 2026-04-03 14:14 by dxiaoxin
[考研] 土木水利328分求调剂 +6 疾风知劲草666 2026-04-02 6/300 2026-04-03 11:38 by znian
[考研] 0710生物学,325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕,331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
[考研] 求调剂,一志愿南京师范大学计算机专硕,初试373,六级通过, +3 计算机追梦人 2026-04-01 3/150 2026-04-02 07:57 by fxue1114
[考研] 310分求调剂 +4 成功上岸wang 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:35 by liu823948201
信息提示
请填处理意见